在生命科學(xué)實驗中大部分,利用 Opentrons Flex 搭配 BioTek 讀板器進行吸光度檢測時,精準(zhǔn)配置參數(shù)是獲取可靠數(shù)據(jù)的關(guān)鍵認為。以下從準(zhǔn)備工作服務好、設(shè)置步驟到問題解決新趨勢,詳解配置要點。
移液工作站
一共謀發展、配置前的必要準(zhǔn)備
- 設(shè)備連接與狀態(tài)檢查
確保 Opentrons Flex 與 BioTek 讀板器通過 USB 或以太網(wǎng)接口正確連接 學習。開機后,在 Opentrons Flex 操作界面確認(rèn)讀板器是否被識別聽得懂。若未識別應用優勢,檢查連接線與接口;同時查看讀板器內(nèi)部全方位,確保濾光片安裝正確高效節能、無污漬,光路暢通大局。
- 明確實驗需求
根據(jù)實驗類型(如蛋白定量新創新即將到來、細胞增殖檢測)確定所需波長,像蛋白定量常用 280nm有序推進,MTT 法檢測細胞增殖選 570nm 設施。同時,明確樣本預(yù)期吸光度范圍堅定不移、孔板類型(96 孔板或 384 孔板)組合運用,為參數(shù)設(shè)置提供依據(jù)。
- 設(shè)備校準(zhǔn)
定期使用標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)板對 BioTek 讀板器校準(zhǔn) 指導。嚴(yán)格遵循操作手冊競爭力,確保標(biāo)準(zhǔn)品使用規(guī)范,記錄校準(zhǔn)數(shù)據(jù)進一步完善。若校準(zhǔn)偏差大集聚,聯(lián)系供應(yīng)商維修調(diào)試。
二調整推進、吸光度檢測參數(shù)配置
- 選擇檢測模式
在 Opentrons Flex 控制軟件的讀板器參數(shù)界面狀況,按需選擇檢測模式 。單波長檢測適用于單一特征波長樣本機製;雙波長檢測可消除背景干擾建立和完善;全波長掃描則用于光譜分析,獲取寬范圍吸光度信息參與水平。
- 設(shè)置波長參數(shù)
單波長檢測時大型,輸入實驗波長(如 DNA 濃度測定用 260nm),并利用軟件校準(zhǔn)功能微調(diào) 明確相關要求。雙波長檢測需設(shè)定主波長(樣本特征吸收波長)與參比波長(扣除背景)重要意義。全波長掃描要設(shè)置掃描范圍(200 - 800nm)和波長間隔(常規(guī)分析可選 10 - 20nm) 。
- 調(diào)整其他檢測參數(shù)
告知軟件孔板類型,圈選實際檢測孔位,設(shè)置邊緣補償參數(shù) ,校正孔板邊緣與中心光程差異導(dǎo)致的誤差關鍵技術。讀數(shù)時間可根據(jù)樣本特性延長,確保信號穩(wěn)定共同;積分時間需平衡靈敏度與檢測時長,低吸光度樣本可適當(dāng)延長經過。每個孔測量次數(shù)設(shè)為 2 - 3 次簡單化,計算平均值降低隨機誤差。
- 保存與驗證
完成參數(shù)設(shè)置后命名保存解決方案,便于重復(fù)使用 優勢。正式檢測前善謀新篇,用質(zhì)控樣本或?qū)φ諛颖绢A(yù)實驗增產,對比結(jié)果與已知值,偏差超允許范圍(如 ±5%)則需重新調(diào)整參數(shù)方法。
三行動力、常見問題處理
檢測結(jié)果異常時,先排查樣本制備是否有誤切實把製度,再核對參數(shù)設(shè)置 保供。若樣本與參數(shù)無誤,可能是設(shè)備故障進行部署,如濾光片損壞責任、光源強度下降,需專業(yè)維修保護好。遇到軟件通信中斷組建,檢查連接線,查看設(shè)備驅(qū)動是否正常特點,更新或重裝驅(qū)動首次,確保設(shè)備軟件版本兼容。
通過規(guī)范準(zhǔn)備部署安排、精準(zhǔn)設(shè)置參數(shù)和及時處理問題搖籃,可充分發(fā)揮設(shè)備性能,為實驗提供可靠的吸光度檢測數(shù)據(jù)推廣開來。
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