涉及 LC-MS 樣品制備的工作流程

LC-MS 樣品制備通常用于這些工作流程：

1. 蛋白質(zhì)組學(xué)：用于蛋白質(zhì)鑒定堅持好、定量和翻譯后修飾分析即將展開。
2. 代謝組學(xué)：研究小分子和代謝途徑。
3. 藥物分析：用于藥物發(fā)現(xiàn)特性、藥代動(dòng)力學(xué)和代謝研究傳承。
4. 環(huán)境和食品分析：用于檢測(cè)污染物或殘留物。

LC-MS 樣品制備的最佳方法

固相萃取 (SPE)

固相萃取 (SPE) 是分析實(shí)驗(yàn)室制備樣品的一項(xiàng)重要技術(shù)建言直達，尤其適用于 LC-MS 等色譜分析多種。這種方法主要是利用固相固定相從液體樣品中分離分析物，在去除干擾化合物的同時(shí)有效地純化和濃縮分析物充分發揮。SPE 提高了樣品與色譜法的兼容性發展成就，改進(jìn)了定性和定量分析，并延長(zhǎng)了分析系統(tǒng)的使用壽命重要方式。SPE 以其快速處理和適應(yīng)自動(dòng)化而著稱(chēng)開展面對面，尤其適用于處理尿液、血液和食品等復(fù)雜基質(zhì)樣品非常重要，與液液萃取相比回收率更高進一步提升。

• 色譜柱條件化：通過(guò)溶劑對(duì)色譜柱中的吸附劑進(jìn)行條件化，準(zhǔn)備其有效結(jié)合分析物營造一處。
• 樣本加載：將樣本引入經(jīng)過(guò)條件化的吸附劑中改革創新。在這個(gè)階段，分析物會(huì)被捕獲取得顯著成效，同時(shí)一些雜質(zhì)也可能附著新模式。
• 洗滌：清除非特異性結(jié)合的雜質(zhì)，以提高捕獲分析物的純度不容忽視，并減少分析中的背景干擾組織了。
• 洗脫與收集：最后，從吸附劑中洗脫分析物不要畏懼。如有必要各領域，對(duì)洗脫液進(jìn)行進(jìn)一步處理，以確保其與LC-MS/MS的兼容性保持競爭優勢，然后進(jìn)行分析進行培訓。

蛋白質(zhì)沉淀

蛋白質(zhì)沉淀是一種廣泛使用的技術(shù)發展機遇，旨在去除生物樣本中的蛋白質(zhì)。這種方法對(duì)于制備蛋白質(zhì)含量較高的樣品（如血漿或血清）至關(guān)重要法治力量。通過(guò)沉淀蛋白質(zhì)全技術方案，可簡(jiǎn)化樣品基質(zhì)，減少對(duì)后續(xù) LC-MS 分析的干擾共享。該方法因其簡(jiǎn)便信息化、快速、有效而備受青睞生動，可用于處理大量和復(fù)雜的生物基質(zhì)新型儲能。它不僅能改善小分子分析，還能將可能影響 LC-MS 分析準(zhǔn)確性和靈敏度的基質(zhì)效應(yīng)降至最低新品技。

• 沉淀試劑的添加：向生物樣本中加入沉淀試劑（如乙腈範圍、甲醇或三氟醋酸），使蛋白質(zhì)變性并聚集紮實做。
• 孵育：允許混合物孵育空間廣闊，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的完全沉淀。此步驟的持續(xù)時(shí)間可能根據(jù)沉淀試劑和樣本類(lèi)型有所不同提供深度撮合服務。
• 離心：對(duì)樣本進(jìn)行離心服務品質，分離沉淀的蛋白質(zhì)與含有分析物的上清液。
• 上清液收集：小心收集上清液組成部分，上清液現(xiàn)在包含了感興趣的分析物影響，免受蛋白質(zhì)干擾。
• 可選后處理：根據(jù)LC-MS分析的具體要求技術節能，上清液可能會(huì)進(jìn)一步處理指導，例如溶劑蒸發(fā)或稀釋。

液-液萃葒H要求。↙LE）

液-液萃取是指根據(jù)分析物在兩種不相溶液體（通常是水相和有機(jī)溶劑）中的溶解度差異將其分離流動性。這種方法對(duì)于從復(fù)雜的水性基質(zhì)（如生物液體）中提取分析物至關(guān)重要，對(duì)于非極性或中等極性化合物尤其有效競爭激烈。LLE 能夠有效分離和濃縮分析物持續創新，同時(shí)去除水溶性干擾，從而提高 LC-MS 分析的靈敏度和特異性智慧與合力，因此備受推崇喜愛。該技術(shù)用途廣泛，可根據(jù)不同的樣品量進(jìn)行調(diào)整開放要求。

• 相選擇和混合：選擇適當(dāng)?shù)牟豢苫烊苋軇粋€(gè)水相和一個(gè)有機(jī)相向好態勢。將樣本與這些溶劑混合，確保分析物優(yōu)先溶解在有機(jī)相中。
• 相分離：讓混合物靜置貢獻力量，或使用離心加速相分離使用。分析物將分配到有機(jī)溶劑中，而大多數(shù)水相中的雜質(zhì)則留在水層發行速度。
• 有機(jī)相收集：小心收集有機(jī)相更加堅強，其中包含提取的分析物。此步驟需要精確操作性能，以避免相間交叉污染初步建立。

LC-MS樣品制備中的衍生化

LC-MS 樣品制備中的衍生化是一種化學(xué)修飾過(guò)程，通過(guò)轉(zhuǎn)化分析物的活性基團(tuán)來(lái)提高其檢測(cè)和定量能力供給。這種技術(shù)尤其適用于固有檢測(cè)能力較低的分析物的方法，如缺乏發(fā)色團(tuán)或熒光團(tuán)的分析物。衍生化可以改善分析物的理化性質(zhì)重要的意義，如揮發(fā)性持續、穩(wěn)定性和電離效率等多個領域，使其更適于 LC-MS 分析再獲。它對(duì)于分析類(lèi)固醇、氨基酸和糖類(lèi)等特定化合物類(lèi)別至關(guān)重要應用擴展，可顯著提高靈敏度體驗區、選擇性和整體分析性能。

為什么LC-MS樣品制備如此困難：

• 基質(zhì)效應(yīng)： 許多樣品活動上，尤其是生物樣品有望，都有復(fù)雜的基質(zhì)，會(huì)干擾 LC-MS 分析導向作用。
• 分析物多樣性： 不同的分析物可能需要不同的制備技術(shù)方案。
• 靈敏度和特異性： 要達(dá)到必要的靈敏度和特異性，需要進(jìn)行仔細(xì)的優(yōu)化十大行動。