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質(zhì)譜分析

一種測(cè)量離子質(zhì)荷比的分析技術(shù)。其目的是通過測(cè)量氣相離子的質(zhì)荷比和豐度來確定樣品中存在的化學(xué)物質(zhì)的數(shù)量和類型保持競爭優勢。

需要質(zhì)譜分析的工作流程:

  • 蛋白質(zhì)鑒定和表征:確定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)和翻譯后修飾進行培訓。
  • 定量蛋白質(zhì)組學(xué):測(cè)量不同樣本之間蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化。
  • 小分子分析:包括藥物代謝研究長效機製、殘留分析物聯與互聯、環(huán)境污染物檢測(cè)。

進(jìn)行質(zhì)譜分析的方法:


MALDI-TOF(基質(zhì)輔助激光解吸/電離--飛行時(shí)間質(zhì)譜改造層面,Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization – Time of Flight)

MALDI-TOF 是一種 “軟電離 ”技術(shù)供給,非常適合分析蛋白質(zhì)和肽等大型生物分子,而不會(huì)造成碎裂經驗分享。通過將樣品與基質(zhì)混合并使用激光脈沖解決方案,它可以使樣品離子化。它的主要優(yōu)勢(shì)在于能夠快速分析大分子不難發現,因此在蛋白質(zhì)組學(xué)和微生物鑒定方面特別有用貢獻法治。

電噴霧電離(Electrospray Ionization, ESI)

ESI 的工作原理是將樣品溶液通過高壓針,產(chǎn)生帶電液滴發展需要,從而產(chǎn)生離子攻堅克難。它的多功能性非常突出,可以電離從小分子到大蛋白質(zhì)的各種化合物顯示。ESI 與液相色譜法(LC)兼容雙向互動,可實(shí)現(xiàn)無縫分離和后續(xù) MS 分析,是代謝組學(xué)和脂質(zhì)組學(xué)的首選設計能力。

串聯(lián)質(zhì)譜法(Tandem Mass Spectrometry, MS/MS)

MS/MS 分為兩個(gè)階段品牌,首先分離離子,然后對(duì)選定的離子進(jìn)行碎片化更為一致,最后對(duì)碎片進(jìn)行分析等形式。其優(yōu)勢(shì)在于提供詳細(xì)的結(jié)構(gòu)信息,尤其是肽的結(jié)構(gòu)信息研究與應用。通過瞄準(zhǔn)特定離子并監(jiān)測(cè)其碎片飛躍,MS/MS 提供了無與倫比的特異性和精確性,使其在蛋白質(zhì)組學(xué)和精確定量分析方面具有無可估量的價(jià)值全面協議。

質(zhì)譜樣品制備

為質(zhì)譜分析準(zhǔn)備生物樣本的過程重要部署。這包括從復(fù)雜混合物中提取、純化和濃縮相關(guān)分子。其主要目的是確保樣品的形態(tài)適合質(zhì)譜分析智慧與合力,不含可能干擾質(zhì)譜讀數(shù)的污染物喜愛,并且濃度足以被檢測(cè)到。

如何實(shí)現(xiàn)質(zhì)譜樣品制備過程的自動(dòng)化:

  • 移液工作站:這些工作站可以自動(dòng)進(jìn)行移液開放要求,減少人為錯(cuò)誤并提高通量向好態勢。
  • 自動(dòng)化SPE系統(tǒng): 無需人工干預(yù)即可處理提取和凈化步驟。
  • 整合系統(tǒng): 一些系統(tǒng)可以集成樣品制備過程中從提取到凈化到濃縮的多個(gè)步驟達到。

質(zhì)譜樣品制備從未如此簡(jiǎn)單

OT-2是一款臺(tái)式液體處理器智能設備,設(shè)計(jì)易于使用,足夠靈活蓬勃發展,可以自動(dòng)化許多常見應(yīng)用特點。

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質(zhì)譜儀樣品制備自動(dòng)化比手動(dòng)移液的優(yōu)勢(shì):

  1. 一致性和可重復(fù)性: 自動(dòng)化減少了人為錯(cuò)誤帶來的可變性。
  2. 吞吐量更高: 自動(dòng)化系統(tǒng)可同時(shí)處理多個(gè)樣品重要性,提高效率又進了一步。
  3. 降低污染風(fēng)險(xiǎn): 減少人工處理意味著減少引入污染物的機(jī)會(huì)。
  4. 節(jié)省時(shí)間: 自動(dòng)化可讓研究人員專注于數(shù)據(jù)分析和解釋多元化服務體系,而不是重復(fù)性的樣品制備任務(wù)規劃。

資源聚焦

Opentrons 可幫助您通過 OT-2和Opentrons Flex的開源協(xié)議實(shí)現(xiàn)質(zhì)譜樣品制備自動(dòng)化

質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)


氣相色譜-質(zhì)譜法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)

氣相色譜-質(zhì)譜儀專門分析揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性化合物。它融合了氣相色譜法的分離能力和質(zhì)譜法的鑒定能力深度,通常用于法醫(yī)帶動擴大、環(huán)境監(jiān)測(cè)和風(fēng)味分析。它的優(yōu)勢(shì)在于利用完善的庫(kù)對(duì)有機(jī)化合物進(jìn)行精確鑒定開拓創新。     

液相色譜-質(zhì)譜法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS)

液相色譜-質(zhì)譜法將質(zhì)譜法的適用范圍擴(kuò)展到熱敏性和非揮發(fā)性化合物持續發展。通過將液相色譜的廣泛分離能力與詳細(xì)的質(zhì)譜分析相結(jié)合,液相色譜-質(zhì)譜法在蛋白質(zhì)組學(xué)促進善治、藥物開發(fā)和代謝物分析中變得非常有價(jià)值擴大。它能夠處理更大、更多樣的分子發揮效力,彌補(bǔ)了 GC-MS 的不足新格局。

GC-MS LC-MS
概述 氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用 液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用
樣品類型 揮發(fā)性和熱穩(wěn)定化合物 非揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定化合物
電離技術(shù) 電子轟擊電離(EI)、化學(xué)電離(CI) 電噴霧電離(ESI)安全鏈、大氣壓化學(xué)電離(APCI)
應(yīng)用 法醫(yī)學(xué)顯示、環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物檢測(cè)真正做到、風(fēng)味分析 蛋白質(zhì)組學(xué)重要作用、藥物開發(fā)、代謝產(chǎn)物分析
復(fù)雜性與維護(hù) 中等習慣;維護(hù)主要集中在柱子和質(zhì)譜的條件上 較高;可能出現(xiàn)柱子堵塞和污染
分辨率 高(取決于柱子和儀器) 高(取決于柱子和儀器)
典型用途 藥物檢測(cè)、環(huán)境污染物的積極性、代謝組學(xué) 生物分子綠色化發展、肽類、藥物使命責任、大型有機(jī)分子
檢測(cè)器靈敏度 對(duì)揮發(fā)性化合物靈敏度高 靈敏度高效果,尤其是現(xiàn)代檢測(cè)器,適用于更廣泛的化合物
優(yōu)點(diǎn) 對(duì)各種揮發(fā)性有機(jī)化合物有效合規意識,方法成熟且具有完善的數(shù)據(jù)庫(kù) 適用范圍廣密度增加,可以處理較大和更多樣的化合物
局限性 僅限于揮發(fā)性和熱穩(wěn)定化合物,電離時(shí)可能產(chǎn)生碎片化使光譜復(fù)雜化 由于多步驟操作創新內容,可能導(dǎo)致樣品損失或降解機遇與挑戰,靈敏度可能受基質(zhì)效應(yīng)影響

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