簡介
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實驗）是一種被廣泛應(yīng)用于診斷和研究領(lǐng)域的重要測試方法保護好。在這項技術(shù)中高效利用，確保樣本處理的一致性至關(guān)重要，而減少人工操作時間則可以有效降低人為誤差調整推進。我們利用Opentrons OT-2 和 Flex 液體處理工作站邁出了重要的一步，開發(fā)并測試了多種自動化協(xié)議發展目標奮鬥。通過這些自動化協(xié)議，您可以直接使用 ELISA 試劑盒進行實驗進一步，也可以根據(jù)需要定制特定的實驗流程大部分。

方法

試劑盒: Takara Fibronectin (FN) EIA Kit
（夾心法ELISA強大的功能，圖1）

• 儀器: Opentrons OT-2
• 工作流程:

1. 加樣（靶向捕獲）
2. 洗滌
3. 加酶標(biāo)抗體
4. 洗滌
5. 加顯色底物

檢測方法: Tecan Cortisol Saliva ELISA Kit
（競爭法ELISA，圖2）

• 儀器: Opentrons OT-2
• 工作流程:

1. 加樣（靶向捕獲）&標(biāo)記抗原
2. 洗滌
3. 加顯色底物

• 檢測方法: Cell Sciences SARS-CoV-2 Surrogate Virus Neutralization Test Kit
  （競爭法ELISA解決方案，圖3）
• 儀器: Opentrons OT-2
• 工作流程:

1. 加樣（靶向捕獲） & 標(biāo)記ACE2
2. 洗滌
3. 加顯色底物

• 檢測方法: SARS-CoV-2 Spike RBD-coupled Magnetic Beads
  (磁珠式ELISA, 圖4)
• 儀器: Opentrons OT-2 & 磁力架模塊
• 工作流程:

1. 加樣（靶向捕獲）
2. 洗滌
3. 加酶標(biāo)抗體
4. 洗滌
5. 加顯色底物

檢測：細胞因子檢測的測定方法開發(fā)（夾心法 ELISA優勢，圖 5 ）
儀器: Opentrons Flex
工作流程:
1 .ELISA 板準(zhǔn)備
2.洗滌
3.加樣（靶向捕獲）
4.洗滌
5.加酶標(biāo)抗體
6.洗滌
7.加底物顯色

結(jié)果

圖 6. Takara Fibronectin (FN) EIA Kit（圖 1 ）。對FN樣品進行梯度稀釋并檢驗增產，檢驗結(jié)果如圖所示:
左圖為FN樣品濃度和平均吸光度（n=3）數(shù)據(jù)便利性，呈高度線性回歸；右圖為3次重復(fù)實驗結(jié)果行動力，呈現(xiàn)良好
的重復(fù)性和穩(wěn)定性提供有力支撐。

圖 7. Tecan Cortisol Saliva ELISA Kit （圖 2 ）。對皮質(zhì)醇樣品進行梯度稀釋并檢驗保供，檢驗結(jié)果如圖
所示：左圖為皮質(zhì)醇樣品濃度和平均吸光度（n=3）數(shù)據(jù)自行開發，呈高度線性回歸；右圖為3次重復(fù)實驗結(jié)
果引領，呈現(xiàn)良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性傳遞。

圖 8. Cell Sciences SARS-CoV-2 Surrogate（圖 3 ）。檢驗結(jié)果表明勞動精神，陽性的人血清樣本（
之前已通過 FDA 認證的 ELISA 實驗檢測結(jié)果為陽性）開展攻關合作，在該測試中呈現(xiàn)結(jié)果為陽性（抑制率 >
20%，計算公式：抑制率 = [1 - (樣本的OD450值 / 陰性對照的OD值)] x 100% 預下達，n = 3）的有效手段。

圖 9. SARS-CoV-2 Spike RBD-coupled Magnetic Beads（圖 4 ）。對重組中和抗體樣品進
行梯度稀釋并檢驗方案。檢驗結(jié)果表明關鍵技術，陽性的人血清樣本（之前已通過 FDA 認證的 ELISA 實驗
檢測結(jié)果為陽性），在該測試中呈現(xiàn)結(jié)果為陽性（n = 3）（右）深入。

圖 10. Assay Development for Cytokine Detection（圖 5 ）技術研究。在 96 孔板涂覆抗 TNF-alpha
抗體和抗IFN-gamma抗體，對含有細胞因子的樣品進行ELISA檢測開展研究，數(shù)據(jù)如圖所示
（n=6）姿勢。

結(jié)論

• 該工作站可以用于執(zhí)行從加抗體/抗原到加顯色底物的完整 ELISA 流程
• 結(jié)果表明樣本處理的一致性高（變異系數(shù)<10%）、準(zhǔn)確性高（R-squared>0.99）首要任務，重復(fù)性
  好綠色化。
• 以 SARS-CoV-2 抗體檢測為例，基于 96 孔板的商用試劑和基于磁珠的自制 ELISA 試劑均可
  實現(xiàn)全自動化處理發展，且結(jié)果與 FDA 認證的 Elisa 方法測定結(jié)果一致保持穩定。