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如何選擇合適的移液器?

為實驗室任務選擇合適的移液器至關重要深入,這凸顯了移液準確性和效率在整個科學和醫(yī)學研究中的重要性總之。本白皮書概述了兩大類移液器——空氣置換式和正置換式——并根據(jù)特定的工作流程要求提供了最佳使用移液器的技巧。

1 簡介
使用移液器處理和轉(zhuǎn)移少量液體的能力是許多科學和醫(yī)療程序的基礎重要意義。因此統籌發展,選擇正確的移液器并使用正確的技術至關重要深化涉外。為特定應用選擇合適的移液器可以顯著影響吞吐量和工作流程,最終改善結(jié)果并提高生產(chǎn)率生產製造。不同類型的移液工具可幫助實現(xiàn)最佳結(jié)果和更高的生產(chǎn)率開展試點,同時提供額外的好處,例如改進的人體工程學特性和針對特定應用的更好的功能共同。移液器有兩種主要類型:空氣置換和正位移充分發揮。兩種位移類型都使用活塞的直徑和沖程長度來確定分配的液體量。本白皮書概述了常見類型的移液器充分發揮,并提供了有關如何根據(jù)您的工作流程充分利用移液器的寶貴提示選擇適用。

空氣置換移液器

2 空氣置換移液器
空氣置換移液器是實驗室中最常見的移液儀器。這些移液器的操作方式是將吸頭末端放入液體樣品中設計,然后釋放柱塞按鈕業務指導。當移液器活塞在體內(nèi)向上移動時,會產(chǎn)生部分真空就此掀開,液體樣品會被吸入吸頭內(nèi)部以填充空隙長足發展。
空氣置換式移液器:

  • 與水溶液一起使用時非常準確
  • 推薦用于標準應用
  • 依賴于技術

移液周期和技術
移液周期
使用任何空氣置換式移液器時,移液周期包括四個主要步驟:

  1. 吸頭裝載
  2. 液體吸入(按下穩步前行、保持并釋放柱塞)
  3. 液體分配/吹出(按下結構不合理、保持并釋放柱塞)
  4. 吸頭彈出
    在分配任何類型的液體時,此循環(huán)都會重復多次逐步改善。所有手動空氣置換移液器都使用相同的移液循環(huán)來分配液體銘記囑托。設置要分配的所需體積(微升),然后以穩(wěn)定的速度按下/釋放柱塞按鈕到特定位置 - “第一”和“第二”停止(也稱為“中性”和“吹出”)自動化裝置。第一停止允許吸入和/或分配液體示範,而第二停止控制吹出到指定的容器中(圖 2)。
空氣置換移液器和移液器操作

移液技術
移液技術可以說是提供準確體積的最關鍵因素之一有很大提升空間,但它經(jīng)常被忽視運行好。培訓不足、錯誤假設和對樣品性質(zhì)缺乏了解會極大地影響實驗結(jié)果和可重復性可能性更大。

正確的移液技術對于實現(xiàn)高精度至關重要部署安排。人們普遍認為,使用空氣置換移液器獲得的結(jié)果取決于技術技術。使用空氣置換移液器時推廣開來,有兩種不同但功能強大的技術:正向和反向移液。每種技術都使用相同的移液循環(huán)相對較高,但某些步驟略有不同資源配置。對于應用或每種技術,這兩種技術的最大區(qū)別取決于樣品的性質(zhì)和需要執(zhí)行協(xié)議的溫度。正向技術可以在移液水溶液時準確輸送體積大力發展,而反向移液在處理具有挑戰(zhàn)性的液體(例如粘稠豐富內涵、稠密)時是強烈推薦的。正向和反向移液之間的主要區(qū)別在于移液循環(huán)的前兩個步驟(例如液體抽吸)建言直達。在執(zhí)行正向技術時多種,柱塞被壓到第一個停止點(圖 3A)。使用反向技術充分發揮,柱塞被壓到第二個停止點(圖 3B)發展成就。

3 正排量移液器
雖然正排量移液器不如空氣排量移液器常見,但在實驗室環(huán)境中經(jīng)持匾绞??吹交邮叫v。這些移液器使用一次性活塞和毛細管系統(tǒng)來使所選體積產(chǎn)生物理空隙∧J?;钊c樣品直接接觸自動化,當活塞向上移動時,樣品被吸入毛細管(圖 4)高品質。

正排量移液器在移取水溶液時提供高精度不折不扣,但通常建議用于粘稠、致密資源優勢、揮發(fā)性和腐蝕性溶液高效利用。與一次性空氣排量移液器吸頭相比,正排量移液器使用的一次性毛細管和活塞更昂貴估算,因此當它們產(chǎn)生相同的結(jié)果時講理論,建議使用空氣排量移液器。

4 樣品特性和移液器選擇
樣品類型和粘度

某些類型的移液器比其他類型的移液器更適合不同的樣品類型不要畏懼。例如服務為一體,粘稠樣品可能需要不同的技術或移液器才能在實驗中實現(xiàn)良好的準確性 - 較小的隨機誤差(精度)和/或較低的系統(tǒng)誤差(真實度)。樣品粘度通常會對空氣置換移液器和吸頭在移液過程中完全吸入和排出樣品的能力產(chǎn)生不利影響逐漸顯現。當移液與聚丙烯吸頭表面發(fā)生疏水相互作用的液體時全會精神,這個問題會進一步加劇。

水性液體
液體的成??分和性質(zhì)會影響移液準確性拓展基地。決定水性液體物理性質(zhì)的三種物理機制是:

  • 表面張力
  • 內(nèi)聚力
  • 粘附力

表面張力是指液體聚結(jié)成具有最小表面積的形狀的趨勢集中展示。內(nèi)聚力是形成液體的分子的一種特性,它確定了液體的物理結(jié)構(gòu)體系流動性,使其在受到各種物理力時能夠抵抗碎裂探索創新。粘附力是指液體與其表面相互作用的趨勢。水樣中表面張力和內(nèi)聚力的存在直接歸因于氫鍵實現了超越。粘附力可能歸因于疏水新產品、靜電或其他類型的相互作用去完善。
其他液體類型,無論是有機的還是無機的引人註目,也可能表現(xiàn)出大量的內(nèi)聚力和表面張力。內(nèi)聚力和表面張力通常有助于液體在抽吸和分配過程中的移動溝通機製,從而實現(xiàn)最佳的移液精度好宣講。粘附力通常會阻礙液體移動并對移液精度產(chǎn)生不利影響。內(nèi)聚力和表面張力降低的液體以及表現(xiàn)出粘附力的液體通常會表現(xiàn)出更大的移液不準確性領先水平。許多添加劑會顯著降低水性液體中的氫鍵,并可能對移液準確性產(chǎn)生不利影響。這些添加劑包括醇類和其他水溶性有機物戰略布局、表面活性劑事關全面、脂肪酸和乙二醇。

揮發(fā)性有機液體
與水性液體相比狀態,有機液體的表面張力通常較低技術節能,也可能具有揮發(fā)性。揮發(fā)性有機液體在普通室溫下具有較高的蒸汽壓廣泛認同。這種高蒸汽壓是由于沸點較低國際要求,導致大量分子從液體中蒸發(fā)并進入周圍空氣,從而產(chǎn)生其特有的“有機”氣味鍛造。有機分子排入封閉系統(tǒng)(例如吸頭液柱頂部與移液器內(nèi)活塞之間的空氣空間)通常會導致壓力增加競爭激烈。
這種壓力增加,加上表面張力減小和粘度降低改善,通常會導致?lián)]發(fā)性有機液體從移液器吸頭末端滴落空白區。由于轉(zhuǎn)移的液體體積現(xiàn)在與移液器上的預設體積大不相同,因此液體損失導致移液精度顯著下降信息化。應該注意的是形勢,在處理高揮發(fā)性或高蒸汽壓的液體時,不建議使用這兩種空氣置換移液技術取得明顯成效。在這種情況下選擇適用,空氣置換移液器的重現(xiàn)性可能會較差。

正向和反向移液技術

4 移液器選項
手動單通道移液器
緊湊且無處不在的單通道移液器可以說是任何生命科學設施中最常用的儀器設計。盡管新技術和技巧促進了突破性發(fā)現(xiàn)業務指導,但單通道移液器始終是必需的。此外就此掀開,現(xiàn)代移液器的設計和尺寸原理基本保持不變(現(xiàn)代移液器發(fā)明于 1957 年)長足發展,并經(jīng)受住了最新的測定開發(fā)趨勢。生命科學中很少有儀器如此多功能不斷豐富。生命科學的幾乎每個分支都使用單通道移液器 - 從基礎研究到生物技術實施體系、分子生物學、基因組學、基因治療和免疫治療的最新趨勢 - 并且與任何測定格式和容器兼容效果較好,從單個比色皿重要的意義、小瓶和離心管到培養(yǎng)皿、燒瓶和多孔板格式(最多 384 孔微孔板)等多個領域。單通道移液器非常適合使用單個試管且體積通常較小的實驗工作再獲,例如 siRNA 轉(zhuǎn)染,或用于細胞培養(yǎng)或蛋白質(zhì)印跡等技術應用擴展。

電子單通道移液器
電子移液器自 20 世紀 80 年代中期開始面世體驗區。在電子空氣置換移液器中,抽吸和分配由微處理器控制活動上,并通過按下扳機啟動有望,而不是用拇指按下或釋放柱塞按鈕。大多數(shù)用戶會發(fā)現(xiàn)使用電子移液器可以實現(xiàn)更一致的樣品拾取和分配導向作用,提高準確性和可重復性方案,并且?guī)缀跸擞脩糁g的差異。現(xiàn)代電子移液器應該操作簡單十大行動,具有良好的用戶界面和彩色屏幕即將展開。這些移液器用途廣泛,可準確執(zhí)行以下復雜任務:

  • 重復分配
  • 控制滴定
  • 連續(xù)稀釋
  • 從精細樣品中抽吸液體
  • 測量未知樣品體積
    使用電子移液器特性,可以輕松編程活塞的重復運動以混合尖端內(nèi)的兩種溶液傳承。帶有抽吸和分配速度控制的電子移液器可用于移取各種液體。最快的速度最適合移取水性樣品建言直達,而較慢的速度則適用于粘稠多種、起泡或剪切敏感的樣品電子單通道移液器使分析準備工作變得高效而簡單,并簡化了長時間重復的移液工作(例如充分發揮,在細胞的藥物處理過程中)發展成就。
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