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全部 · 2025年01月19日
PCR引物的設(shè)計(jì)原理
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文庫(kù)定量的常見(jiàn)方法與技巧
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文章 · 2025年01月16日
體外DNA擴(kuò)增技術(shù)
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隨著分子生物學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展法治力量,以核酸雜交提高、核酸擴(kuò)增及核酸序列分析為代表的分子診斷和檢測(cè)技術(shù)在諸多領(lǐng)域中日益凸顯出至關(guān)重要的作用初步建立。樣本處理為分子診斷實(shí)驗(yàn)的“第一步”,也是最關(guān)鍵的一步系統穩定性,其獲得的核酸質(zhì)量的優(yōu)劣將直接影響到下游分子生物學(xué)試驗(yàn)的成敗。全球爆發(fā)的新冠病毒相關性,促使了核酸檢測(cè)市場(chǎng)的暴增集成,整個(gè)疫情期間國(guó)內(nèi)的核酸檢測(cè)市場(chǎng)將超過(guò)400億。
核酸提取傳統(tǒng)方法
傳統(tǒng)的提取方法主要有:酚/氯仿抽提法現場、醇沉淀、親和層析柱力量、密度梯度離心和硅膠柱法我有所應。這些傳統(tǒng)提取方法可從不同組織樣本中分離出DNA和RNA,但這些技術(shù)中包含沉淀和離心等操作步驟深入實施,其所需的生物樣本量較大至關重要,提取步驟較為繁雜、費(fèi)時(shí)費(fèi)力效果,得率也不高應用的因素之一,難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作,另外,大部分的傳統(tǒng)方法中還需要用到有毒化學(xué)試劑敢於監督,對(duì)操作人員的健康具有潛在危害幅度,因此,伴隨著分子生物學(xué)以及材料學(xué)的發(fā)展重要的作用,采用磁珠的方法從液相系統(tǒng)中分離純化核酸的新方法已經(jīng)崛起貢獻。
磁珠法分離核酸的原理
納米磁珠是高分子材料或者生物分子包被四氧化三鐵核心而形成的,可以被磁鐵吸附的同時(shí)納米小球穩中求進。用于核酸純化的磁珠表面功能基團(tuán)一般為(OH)和羧基(COOH)統籌。
磁珠分離核酸核心技術(shù)是固相可逆固定化技術(shù),但磁珠和核酸具體是如果相互作用吸附在一起協同控製,目前還不是很清楚振奮起來,鹽橋理論是其中猜想之一。在利用磁珠結(jié)合核酸的體系中利用好,由于緩沖液的作用核酸分子(DNA & RNA)會(huì)由線性變成球狀等地,暴露出核酸骨架上大量的負(fù)電基團(tuán)與反應(yīng)體系中的陽(yáng)離子連接,在磁珠外層負(fù)電基團(tuán)的作用下尤為突出,形成“陰離子-陽(yáng)離子-陰離子”的鹽橋結(jié)構(gòu)規定,使核酸分子被特異性地吸附到磁珠表面。而當(dāng)反應(yīng)緩沖液被棄除后空間載體,加入水性分子高質量,會(huì)快速充分水化核酸分子,解除三者之間的離子相互作用重要組成部分,使吸附到磁珠上的核酸分子被純化出來(lái)流程。
磁珠法核酸提取是納米科技與生物技術(shù)的完美結(jié)合。納米磁珠由于尺寸小勃勃生機,具有超大的比表面積助力各業。利用納米技術(shù)對(duì)磁珠表面進(jìn)行修飾,使磁珠表面具有更多核酸結(jié)合位點(diǎn)提供有力支撐,從提高了納米磁珠對(duì)核酸提取回收效率和靈敏度不合理波動。
核酸提取具有如下特點(diǎn):
經(jīng)驗(yàn)豐富的服務(wù)團(tuán)隊(duì)和強(qiáng)大的生產(chǎn)支持團(tuán)隊(duì)為客戶提供無(wú)憂的訂單服務(wù)。