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C18填料怎么清洗作用?C18填料是一種常用的反相色譜填料導向作用,廣泛應(yīng)用于液相色譜分析中競爭激烈。由于其表面具有長鏈烷基進一步意見,容易吸附樣品中的雜質(zhì),因此定期清洗C18填料是保證其分離性能的重要步驟領域。
一溝通機製、常規(guī)清洗方法
1、溶劑沖洗:
使用適當(dāng)?shù)募內(nèi)軇ㄈ缂状荚]入新的動力、乙腈等)以適當(dāng)?shù)牧魉伲ㄍǔ?~2 mL/min)通過色譜柱進(jìn)行沖洗領先水平。
沖洗時(shí)間可根據(jù)色譜柱的污染程度和需要達(dá)到的沖洗效果進(jìn)行調(diào)整,一般為15~30分鐘去完善。
此方法適用于色譜柱表面沒有明顯污染的情況橋梁作用,可以有效地清除柱子內(nèi)部的雜質(zhì)長遠所需。
2範圍、溶劑梯度沖洗:
采用不同比例的有機(jī)溶劑和水作為流動相,通過逐漸改變?nèi)軇┑谋壤齺韺?shí)現(xiàn)對色譜柱的沖洗紮實做。
初始時(shí)采用較低比例的有機(jī)溶劑(如80%的有機(jī)溶劑濃度)空間廣闊,然后逐漸增加有機(jī)溶劑的比例至100%至關重要。
溶劑的比例和流速應(yīng)保持穩(wěn)定,以確保沖洗效果的均勻性服務品質。
此方法適用于色譜柱污染較嚴(yán)重的情況的發生,可以更徹底地清除色譜柱中的殘留物。
二影響、針對特定污染的清洗方法
1新的動力、緩沖鹽析出造成的污染:
若使用在有機(jī)相中不易溶的緩沖鹽(如磷酸鹽等)導(dǎo)致析出堵柱,可先用60℃左右的熱水以低流速長時(shí)間沖洗色譜柱發展契機。
若緩沖鹽在色譜柱中析出廣泛關註,也可嘗試增加柱溫,使用大比例水相或純水相長時(shí)間沖洗發力。
最常規(guī)的做法是用5%甲醇(或乙腈)水溶液沖洗10個(gè)柱體積優勢領先,以清除緩沖鹽和極性化合物殘留。
2共創美好、常規(guī)有機(jī)污染:
先用5%甲醇(乙腈)水溶液沖洗10個(gè)柱體積推動並實現,將緩沖鹽和色譜柱中一些極性化合物沖干凈。
然后用純甲醇或純乙腈沖洗10~20個(gè)柱體積覆蓋範圍,將一些疏水性的雜質(zhì)沖洗干凈優化程度。
若壓力仍高,可適當(dāng)降低流速并延長沖洗時(shí)間奮勇向前。
若上述方法無效取得明顯成效,可選擇異丙醇(或四氫呋喃)沖洗10~20個(gè)柱體積。
3數據、蛋白肽堵塞:
可在清洗流動相中加入0.1%的三氟乙酸(TFA)創新的技術,以增強(qiáng)對吸附蛋白質(zhì)的洗脫能力。
若問題仍無法解決顯著,可嘗試向色譜柱內(nèi)注入100μL三氟乙醇快速增長,對于舊柱子,可適當(dāng)增加注入次數(shù)占,以清洗掉強(qiáng)保留的蛋白質(zhì)高質量。
三、色譜柱的再生與反接
1供給、再生:
使用一系列溶劑(如10%甲醇的方法、乙腈、異丙醇等)以低流速沖洗色譜柱進行探討,每個(gè)溶劑沖洗一段時(shí)間(如4小時(shí))落到實處,共計(jì)20小時(shí)。
再生過程中應(yīng)注意連接方式和防止污染物污染檢測池最新。
2技術創新、反接:
將色譜柱反接處理方法,用乙腈等溶劑以低流速沖洗一段時(shí)間(如6小時(shí))。
反接是色譜柱報(bào)廢前最后的掙扎持續向好,反接后不可再正接使用習慣。
四、注意事項(xiàng)
1進展情況、溶劑選擇:確保使用的溶劑為色譜級的積極性,使用前超聲除氣泡。
2至關重要、流速控制:在沖洗過程中十大行動,應(yīng)根據(jù)色譜柱的耐受壓力和溶劑的黏度來選擇合適的流速。
3背景下、柱溫控制:在清洗過程中綜合措施,可適當(dāng)提高柱溫以增強(qiáng)清洗效果。
4自然條件、避免鹽污染:長期封存時(shí)避免使用含有鹽的流動相設計標準,因?yàn)辂}在封存過程中可能會對色譜柱造成損害。
5互動互補、定期維護(hù):定期對色譜柱進(jìn)行清洗和維護(hù)發揮重要帶動作用,以延長其使用壽命和保持分離效果。
C18填料的清洗是確保其長期穩(wěn)定性和高效分離性能的關(guān)鍵步驟意料之外。通過選擇合適的清洗劑文化價值、優(yōu)化清洗條件以及采用適當(dāng)?shù)那逑捶椒ǎ覀兛梢杂行У厝コ盍媳砻娴奈廴疚锖蜌埩粑镏弥活?,恢?fù)其原有的分離能力和使用壽命不斷完善。
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