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DNA稀釋

一種降低DNA濃度的方法，以更好地適應(yīng)各種生物學(xué)程序效果較好，如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)必然趨勢、DNA測(cè)序的可能性、分子克隆和實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)提高。

稀釋 DNA 通常是通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)稀釋相對開放、系列稀釋或使用分光光度計(jì)進(jìn)行的部署安排，對(duì)精度和準(zhǔn)確性要求很高搖籃，人工移液面臨的挑戰(zhàn)包括不準(zhǔn)確、DNA 降解和交叉污染推廣開來。通過(guò)液體處理系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化可提高準(zhǔn)確性推動、可重復(fù)性、效率和吞吐量資源配置，同時(shí)降低污染風(fēng)險(xiǎn)，從而改善流程。

稀釋 DNA 的工作流程

各種工作流程都需要稀釋 DNA實現，例如：

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR):PCR 需要特定濃度的 DNA 作為起始材料
DNA 測(cè)序:Sanger 和下一代測(cè)序(NGS) 都需要特定的 DNA 濃度
分子克隆:DNA稀釋對(duì)于優(yōu)化連接反應(yīng)是必要的
定量 PCR (qPCR):與 PCR 類似表現明顯更佳，qPCR 需要最佳 DNA 濃度才能進(jìn)行準(zhǔn)確定量。

DNA 稀釋從未如此簡(jiǎn)單

OT-2 是一款臺(tái)式液體處理器建言直達，其設(shè)計(jì)足夠方便且靈活多種，可以自動(dòng)化許多常見(jiàn)的應(yīng)用。

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稀釋 DNA 的最佳方法1. 標(biāo)準(zhǔn)稀釋: 將特定體積的 DNA 添加到緩沖溶液中以降低濃度充分發揮。
2. 連續(xù)稀釋: 在此過(guò)程中發展成就，先進(jìn)行初始稀釋，然后逐步進(jìn)行進(jìn)一步稀釋同時。這允許使用一系列濃度來(lái)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件互動式宣講。3. 使用分光光度計(jì)稀釋：使用分光光度計(jì)測(cè)量DNA濃度，然后使用緩沖溶液將DNA稀釋至所需濃度模式。

協(xié)議聚焦

Opentrons 可幫助您使用 OT-2和 Opentrons Flex 的開(kāi)源協(xié)議自動(dòng)進(jìn)行 DNA 稀釋

為何稀釋 DNA 如此困難自動化？

由于需要精確度和準(zhǔn)確度，稀釋 DNA 可能具有挑戰(zhàn)性高品質。測(cè)量中的小錯(cuò)誤可能會(huì)導(dǎo)致最終 DNA 濃度的顯著差異不折不扣，從而影響下游應(yīng)用。此外資源優勢，DNA 容易降解和污染高效利用，這可能發(fā)生在稀釋過(guò)程中。

使用手動(dòng)移液稀釋 DNA 的主要挑戰(zhàn)

不準(zhǔn)確和不精確:移液時(shí)的細(xì)微差別可能會(huì)導(dǎo)致 DNA 濃度出現(xiàn)重大差異估算。
DNA 降解:如果處理不當(dāng)講理論，DNA 可能會(huì)在此過(guò)程中降解。
交叉污染:如果移液器沒(méi)有正確清潔不要畏懼，則存在交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)服務為一體。

自動(dòng)化 DNA 稀釋過(guò)程

自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)可用于自動(dòng)化 DNA 稀釋過(guò)程。這些機(jī)器可以準(zhǔn)確分配精確量的 DNA 和稀釋劑逐漸顯現，從而降低人為錯(cuò)誤的風(fēng),險(xiǎn)并提高可重復(fù)性全會精神。自動(dòng)化方案可以輕松調(diào)整以創(chuàng)建一系列 DNA 濃度系統穩定性。

自動(dòng)化比手動(dòng)移液稀釋 DNA 的優(yōu)勢(shì)

提高精確度和準(zhǔn)確性：與手動(dòng)移液相比，自動(dòng)化系統(tǒng)能更精確地處理極小體積和高濃度的 DNA集中展示。
時(shí)間效率高：自動(dòng)化系統(tǒng)可同時(shí)稀釋多個(gè)樣本實力增強，大大減少了稀釋過(guò)程所花費(fèi)的時(shí)間。
降低污染風(fēng)險(xiǎn)：自動(dòng)化系統(tǒng)可將交叉污染和 DNA 降解的風(fēng)險(xiǎn)降至最低共享。

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