涉及 LC-MS 樣品制備的工作流程

LC-MS 樣品制備通常用于這些工作流程：

1. 蛋白質(zhì)組學(xué)：用于蛋白質(zhì)鑒定效果、定量和翻譯后修飾分析。
2. 代謝組學(xué)：研究小分子和代謝途徑足了準備。
3. 藥物分析：用于藥物發(fā)現(xiàn)合作關系、藥代動(dòng)力學(xué)和代謝研究。
4. 環(huán)境和食品分析：用于檢測(cè)污染物或殘留物深刻內涵。

LC-MS 樣品制備的最佳方法

固相萃取 (SPE)

固相萃取 (SPE) 是分析實(shí)驗(yàn)室制備樣品的一項(xiàng)重要技術(shù)傳遞，尤其適用于 LC-MS 等色譜分析。這種方法主要是利用固相固定相從液體樣品中分離分析物深入闡釋，在去除干擾化合物的同時(shí)有效地純化和濃縮分析物更加廣闊。SPE 提高了樣品與色譜法的兼容性，改進(jìn)了定性和定量分析提高，并延長(zhǎng)了分析系統(tǒng)的使用壽命可以使用。SPE 以其快速處理和適應(yīng)自動(dòng)化而著稱，尤其適用于處理尿液紮實、血液和食品等復(fù)雜基質(zhì)樣品效高化，與液液萃取相比回收率更高。

• 色譜柱條件化：通過(guò)溶劑對(duì)色譜柱中的吸附劑進(jìn)行條件化投入力度，準(zhǔn)備其有效結(jié)合分析物創造。
• 樣本加載：將樣本引入經(jīng)過(guò)條件化的吸附劑中。在這個(gè)階段貢獻法治，分析物會(huì)被捕獲設備製造，同時(shí)一些雜質(zhì)也可能附著發展需要。
• 洗滌：清除非特異性結(jié)合的雜質(zhì)，以提高捕獲分析物的純度管理，并減少分析中的背景干擾顯示。
• 洗脫與收集：最后，從吸附劑中洗脫分析物效率和安。如有必要設計能力，對(duì)洗脫液進(jìn)行進(jìn)一步處理，以確保其與LC-MS/MS的兼容性極致用戶體驗，然后進(jìn)行分析提供有力支撐。

蛋白質(zhì)沉淀

蛋白質(zhì)沉淀是一種廣泛使用的技術(shù)，旨在去除生物樣本中的蛋白質(zhì)建議。這種方法對(duì)于制備蛋白質(zhì)含量較高的樣品（如血漿或血清）至關(guān)重要品率。通過(guò)沉淀蛋白質(zhì)，可簡(jiǎn)化樣品基質(zhì)不斷發展，減少對(duì)后續(xù) LC-MS 分析的干擾技術發展。該方法因其簡(jiǎn)便、快速集成、有效而備受青睞重要手段，可用于處理大量和復(fù)雜的生物基質(zhì)。它不僅能改善小分子分析穩定性，還能將可能影響 LC-MS 分析準(zhǔn)確性和靈敏度的基質(zhì)效應(yīng)降至最低像一棵樹。

• 沉淀試劑的添加：向生物樣本中加入沉淀試劑（如乙腈、甲醇或三氟醋酸）去突破，使蛋白質(zhì)變性并聚集能運用。
• 孵育：允許混合物孵育，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的完全沉淀智能設備。此步驟的持續(xù)時(shí)間可能根據(jù)沉淀試劑和樣本類型有所不同不可缺少。
• 離心：對(duì)樣本進(jìn)行離心，分離沉淀的蛋白質(zhì)與含有分析物的上清液特點。
• 上清液收集：小心收集上清液積極回應，上清液現(xiàn)在包含了感興趣的分析物，免受蛋白質(zhì)干擾又進了一步。
• 可選后處理：根據(jù)LC-MS分析的具體要求多種場景，上清液可能會(huì)進(jìn)一步處理，例如溶劑蒸發(fā)或稀釋規劃。

液-液萃葦U大公共數據。↙LE）

液-液萃取是指根據(jù)分析物在兩種不相溶液體（通常是水相和有機(jī)溶劑）中的溶解度差異將其分離。這種方法對(duì)于從復(fù)雜的水性基質(zhì)（如生物液體）中提取分析物至關(guān)重要，對(duì)于非極性或中等極性化合物尤其有效核心技術體系。LLE 能夠有效分離和濃縮分析物開拓創新，同時(shí)去除水溶性干擾，從而提高 LC-MS 分析的靈敏度和特異性必然趨勢，因此備受推崇主動性。該技術(shù)用途廣泛，可根據(jù)不同的樣品量進(jìn)行調(diào)整要素配置改革。

• 相選擇和混合：選擇適當(dāng)?shù)牟豢苫烊苋軇粋€(gè)水相和一個(gè)有機(jī)相體系。將樣本與這些溶劑混合保障性，確保分析物優(yōu)先溶解在有機(jī)相中帶動產業發展。
• 相分離：讓混合物靜置，或使用離心加速相分離十分落實。分析物將分配到有機(jī)溶劑中倍增效應，而大多數(shù)水相中的雜質(zhì)則留在水層。
• 有機(jī)相收集：小心收集有機(jī)相製造業，其中包含提取的分析物優化服務策略。此步驟需要精確操作，以避免相間交叉污染發展基礎。

LC-MS樣品制備中的衍生化

LC-MS 樣品制備中的衍生化是一種化學(xué)修飾過(guò)程兩個角度入手，通過(guò)轉(zhuǎn)化分析物的活性基團(tuán)來(lái)提高其檢測(cè)和定量能力。這種技術(shù)尤其適用于固有檢測(cè)能力較低的分析物同期，如缺乏發(fā)色團(tuán)或熒光團(tuán)的分析物生產效率。衍生化可以改善分析物的理化性質(zhì)，如揮發(fā)性效果、穩(wěn)定性和電離效率使用，使其更適于 LC-MS 分析。它對(duì)于分析類固醇密度增加、氨基酸和糖類等特定化合物類別至關(guān)重要有效性，可顯著提高靈敏度、選擇性和整體分析性能機遇與挑戰。

為什么LC-MS樣品制備如此困難：

• 基質(zhì)效應(yīng)： 許多樣品廣泛關註，尤其是生物樣品，都有復(fù)雜的基質(zhì)集成技術，會(huì)干擾 LC-MS 分析深入實施。
• 分析物多樣性： 不同的分析物可能需要不同的制備技術(shù)。
• 靈敏度和特異性： 要達(dá)到必要的靈敏度和特異性發展空間，需要進(jìn)行仔細(xì)的優(yōu)化效果。