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使用 Opentrons Flex? 核酸提取工作站純化從細(xì)胞或組織樣本提取基因組 DNA

應(yīng)用優(yōu)勢(shì)

使用 Opentrons Flex? 搭配NucleoMag? Tissue 試劑盒創新內容,進(jìn)行純化核酸的優(yōu)勢(shì):

1.方法經(jīng)過驗(yàn)證面向,確保全自動(dòng)提取純化過程準(zhǔn)確性。
2.產(chǎn)量和純度重復(fù)性好講故事,穩(wěn)定回收基因組 DNA。
3.處理能力強(qiáng),可最多同時(shí)處理 96個(gè)樣品。
4.可訪問 Opentrons 協(xié)議庫(kù)或通過MACHEREY NAGEL 的自動(dòng)化技術(shù)支持[email protected]獲取更多詳細(xì)信息持續創新。

導(dǎo)言

提取基因組 DNA 是生命科學(xué)和應(yīng)用測(cè)試實(shí)驗(yàn)室中常見的實(shí)驗(yàn)流程,尤其在基因分型測(cè)試空白區、測(cè)序和臨床研究等下游應(yīng)用中協調機製,對(duì) DNA 的質(zhì)量和純凈度要求嚴(yán)格。
MACHEREY NAGEL 的 NucleoMag? Tissue 試劑盒提供了基于磁珠的快速基因組 DNA 純化解決方案形勢。該試劑盒設(shè)計(jì)精簡(jiǎn)實踐者,適用于 96 孔板模式,可為 PCR約定管轄、NGS 或其他酶反應(yīng)提供高質(zhì)量數據、高純凈度的 DNA 模板。
結(jié)合 Opentrons Flex? 核酸提取工作站發揮,可高效純化 HeLa 細(xì)胞基因組DNA顯著。該工作站配備Opentrons Flex? 環(huán)形磁力架、加熱振蕩模塊與時俱進,以及5-1000 μL 單通道和 8 通道移液器性能,還可選擇 96 通道移液器,適用于各種樣本類型提取 DNA綜合運用,包括其他真核細(xì)胞或組織供給。
Opentrons Protocol Library 中提供了結(jié)合 Opentrons Flex? 核酸提取工作站與 NucleoMag? Tissue 試劑盒使用的協(xié)議,可直接下載使用效果較好。

應(yīng)用說明 NucleoMag? 組織與 Opentrons Flex?

NucleoMag? Tissue 試劑盒的原理是基于核酸在特定結(jié)合條件下可逆吸附到 NucleoMag?B-beads 上重要的意義。在處理高達(dá) 20 mg 的組織樣本或 1×10^6 個(gè) 細(xì)胞時(shí)持續,首先加入蛋白酶 K 和裂解緩沖液T1等多個領域,然后通過加入緩沖液 MB2 促進(jìn)核酸與磁珠的可逆結(jié)合再獲。隨后,在磁珠吸附后應用擴展,使用洗滌緩沖液 MB3 和 MB4 進(jìn)行洗滌體驗區,以去除鹽和其他雜質(zhì)。接著進(jìn)行干燥步驟或進(jìn)行 MB5 洗滌活動上,最后使用洗脫緩沖液 MB6 將 DNA 洗脫下來有望。所有的移液和磁珠純化步驟都由 Opentrons Flex? 完成。

應(yīng)用數(shù)據(jù)

應(yīng)用數(shù)據(jù)

從HeLa細(xì)胞中提取DNA

利用 Opentrons Flex? 工作站搭配 NucleoMag? Tissue 試劑盒導向作用,成功從2.4×10^5 個(gè) HeLa 細(xì)胞中提取了高純度 DNA方案。通過使 TapeStation 對(duì)純化后的 DNA 進(jìn)行評(píng)估,包括評(píng)估 DNA 完整性(DIN)和片段大小分布(虛擬凝膠成像)十大行動,結(jié)果顯示 DNA 的平均 DIN 值為9.0±0.09左右。這表明 Opentrons Flex? 工作站與 NucleoMag? Tissue試劑盒結(jié)合使用,能夠穩(wěn)定地從 HeLa 細(xì)胞中提取高質(zhì)量的 DNA 綜合措施。

值得信賴的 qPCR 檢測(cè)結(jié)果

通過進(jìn)行 qPCR 分析(用藍(lán)色條表示)可靠保障,使用 PowerTrackTM SYBR GreenMaster Mix 作為試劑,引物經(jīng) IDT 設(shè)計(jì)設計標準,靶向基因組中 β-2- 微球蛋白的一個(gè) 190 bp 區(qū)域開展。qPCR 結(jié)果顯示,在所有測(cè)試樣本中都能穩(wěn)定檢測(cè)到擴(kuò)增片段發揮重要帶動作用,表明這個(gè)自動(dòng)化核酸純化流程適用于各種常見的基于酶的下游應(yīng)用意向。這些結(jié)果證明了 Opentrons Flex? 工作站搭配 NucleoMag? Tissue 試劑盒提取的 DNA 在 qPCR 檢測(cè)中表現(xiàn)出可靠性。

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