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在OT-2上執(zhí)行連續(xù)稀釋

摘要
連續(xù)稀釋度是各種生物實驗的重要組成部分延伸。例如,生成DNA、蛋白質(zhì)或細胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線需要以恒定的稀釋系數(shù)稀釋樣品的用例求得平衡。在這里合理需求,我們提出了一種替代執(zhí)行這些重復(fù)步驟的手動移液建設。opentronOT-2機器人可以在大約2分鐘內(nèi)連續(xù)稀釋8個樣品,稀釋10次在復(fù)制之間具有很高的可靠性十分落實。的的系數(shù)所表示的精度每列的差異與更昂貴的液體處理平臺相當(dāng)優勢與挑戰。我們鼓勵用戶根據(jù)其特定的科學(xué)應(yīng)用程序調(diào)整所附的參數(shù)化協(xié)議經驗分享。

介紹
連續(xù)稀釋既是獨立的實驗,也是更復(fù)雜的實驗管道的構(gòu)件趨勢。應(yīng)用可以是簡單地生成一個標(biāo)準(zhǔn)曲線或更復(fù)雜的表型表征跨細胞培養(yǎng)濃度有力扭轉。在任何應(yīng)用中上高質量,都需要精確的移液才能產(chǎn)生可靠的結(jié)果。一般來說廣度和深度,人工實驗室工作可以在協(xié)議中的任何移液步驟中引入隨機錯誤深入交流。這些移液不準(zhǔn)確可以包含不正確的稀釋因子sampIes.移液管的混合速度和尖端高度可以提高精度,但在手動移液的過程中加強宣傳,要保持不變卻具有挑戰(zhàn)性處理。此外,重復(fù)移液隨著時間的推移在此基礎上,重復(fù)移液會加重?fù)p傷拓展基地。OT-2是一種替代選擇以確保移液的可靠性和最終的連續(xù)稀釋實驗的數(shù)據(jù)質(zhì)量積極回應。

材料
-2液體處理機器人
-2軟件版本3.1.2
-光電管p300多通道移液管
-視中心300μLTip機架
-美國科學(xué)12-channeI自動化水庫(1061-8150)
-康寧96井EIA/RIA易清洗tm透明平底聚苯乙烯(3368)
-康寧500 mL分子生物學(xué)級水(46-000-CV)
-麥考密克公司提供的各種食品顏色和雞蛋染料-藍色

  • Tecan無限F200 pro

協(xié)議
1.用50μL藍色食用染料和10 mL分子生物學(xué)級水制備藍色染料溶液。
2.將200μL的藍色染料溶液加入到96-weIIlat底部釘劑的A1-H1的weIIs中。
3.在槽式儲層的A1孔中加入20 mL稀釋劑長遠所需。
注:最后一次稀釋后的列是空白區(qū)域的默認(rèn)位置關規定。槽/儲層的最后一口井是默認(rèn)的液體垃圾品質。
4.根據(jù)圖1a中的甲板布局不負眾望,在插槽1-3中布置實驗室餐具。
-插槽1=視中心300μLtip機架
-槽2=12通道水庫

  • SIot 3 = 96-weIIlat底部釘
    5.請將協(xié)議中的參數(shù)更改為以下參數(shù):
    -稀釋因子=為1.5
    -最終卷= 200
    -稀釋次數(shù)= 10
    6.繼續(xù)轉(zhuǎn)到OT-2運行應(yīng)用程序性能穩定,上傳您的協(xié)議并校準(zhǔn)實驗室軟件全面革新。
    7.密封平板,并量化吸光度在450 nm情況正常,每針閱讀器25睫毛行業分類。
連續(xù)稀釋的建議甲板布局
圖1a連續(xù)稀釋的建議甲板布局。甲板布局渲染從OT-2運行的應(yīng)用程序提高鍛煉。
OT-2從96英寸底部瀝青的8個雙色染料樣品中盜版100μL
圖1bOT-2從96英寸底部瀝青的8個雙色染料樣品中盜版100μL數據顯示。

結(jié)果
圖1的frst6柱的平均原始吸光度值如圖2所示。每一列顯示比前一列稀釋1.5倍也逐步提升。方差的一致性(CV%)說明了在重復(fù)之間的高可靠性。表1顯示了每個稀釋板的柱狀CV%註入了新的力量。每個柱的平均精度約為2%重要的作用,與使用比OT-2昂貴得多的液體處理器進行的類似實驗的值相當(dāng)1.每個連續(xù)稀釋板在大約2分鐘內(nèi)在OT-2上完成。

8個藍色染料樣品稀釋
圖2:8個藍色染料樣品稀釋1.5倍后去創新,板1(第1-6列)的原始平均吸光度值足夠的實力。

結(jié)論
在這里,我們提出了一個簡單的連續(xù)稀釋實驗結構,說明了OT-2液體處理機器人的高精度移液更適合。除了精度外,OT-2還能夠進行高度可定制的移液技術(shù)溝通協調。用戶可以優(yōu)化抽吸/分配速度要素配置改革,混合速度,空氣間隙和許多其他選項,以更準(zhǔn)確和更有效的液體處理帶動產業發展。自動連續(xù)稀釋將為科學(xué)家提供可靠的移液系統(tǒng)大局,以及寶貴的步行時間,從繁瑣邁出了重要的一步、容易出錯的手工工作有序推進。

可比較的列級方差
表1⌒枨??杀容^的列級方差堅定不移,如安捷倫Bravo。每個表中都顯示了每列的平均方差系數(shù)(%)更讓我明白了。
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