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C18填料怎么清洗?C18填料是一種常用的反相色譜填料,廣泛應用于液相色譜分析中。由于其表面具有長鏈烷基顯示,容易吸附樣品中的雜質不可缺少,因此定期清洗C18填料是保證其分離性能的重要步驟共同努力。
一推動、常規(guī)清洗方法
1還不大、溶劑沖洗:
使用適當的純溶劑(如甲醇市場開拓、乙腈等)以適當的流速(通常為1~2 mL/min)通過色譜柱進行沖洗措施。
沖洗時間可根據色譜柱的污染程度和需要達到的沖洗效果進行調整,一般為15~30分鐘要落實好。
此方法適用于色譜柱表面沒有明顯污染的情況緊密相關,可以有效地清除柱子內部的雜質。
2、溶劑梯度沖洗:
采用不同比例的有機溶劑和水作為流動相培訓,通過逐漸改變溶劑的比例來實現對色譜柱的沖洗不合理波動。
初始時采用較低比例的有機溶劑(如80%的有機溶劑濃度),然后逐漸增加有機溶劑的比例至100%重要工具。
溶劑的比例和流速應保持穩(wěn)定表示,以確保沖洗效果的均勻性。
此方法適用于色譜柱污染較嚴重的情況非常激烈,可以更徹底地清除色譜柱中的殘留物競爭力所在。
二、針對特定污染的清洗方法
1領域、緩沖鹽析出造成的污染:
若使用在有機相中不易溶的緩沖鹽(如磷酸鹽等)導致析出堵柱溝通機製,可先用60℃左右的熱水以低流速長時間沖洗色譜柱。
若緩沖鹽在色譜柱中析出註入新的動力,也可嘗試增加柱溫領先水平,使用大比例水相或純水相長時間沖洗。
最常規(guī)的做法是用5%甲醇(或乙腈)水溶液沖洗10個柱體積雙重提升,以清除緩沖鹽和極性化合物殘留戰略布局。
2、常規(guī)有機污染:
先用5%甲醇(乙腈)水溶液沖洗10個柱體積求索,將緩沖鹽和色譜柱中一些極性化合物沖干凈讓人糾結。
然后用純甲醇或純乙腈沖洗10~20個柱體積,將一些疏水性的雜質沖洗干凈穩定發展。
若壓力仍高,可適當降低流速并延長沖洗時間聯動。
若上述方法無效增持能力,可選擇異丙醇(或四氫呋喃)沖洗10~20個柱體積。
3行業內卷、蛋白肽堵塞:
可在清洗流動相中加入0.1%的三氟乙酸(TFA)追求卓越,以增強對吸附蛋白質的洗脫能力。
若問題仍無法解決參與能力,可嘗試向色譜柱內注入100μL三氟乙醇合理需求,對于舊柱子,可適當增加注入次數充分發揮,以清洗掉強保留的蛋白質高質量。
三、色譜柱的再生與反接
1選擇適用、再生:
使用一系列溶劑(如10%甲醇管理、乙腈、異丙醇等)以低流速沖洗色譜柱業務指導,每個溶劑沖洗一段時間(如4小時)改進措施,共計20小時優化程度。
再生過程中應注意連接方式和防止污染物污染檢測池。
2奮勇向前、反接:
將色譜柱反接不斷豐富,用乙腈等溶劑以低流速沖洗一段時間(如6小時)。
反接是色譜柱報廢前最后的掙扎組建,反接后不可再正接使用創新的技術。
四、注意事項
1顯著、溶劑選擇:確保使用的溶劑為色譜級快速增長,使用前超聲除氣泡。
2占、流速控制:在沖洗過程中高質量,應根據色譜柱的耐受壓力和溶劑的黏度來選擇合適的流速。
3激發創作、柱溫控制:在清洗過程中前景,可適當提高柱溫以增強清洗效果。
4增幅最大、避免鹽污染:長期封存時避免使用含有鹽的流動相共享應用,因為鹽在封存過程中可能會對色譜柱造成損害。
5標準、定期維護:定期對色譜柱進行清洗和維護示範推廣,以延長其使用壽命和保持分離效果。
C18填料的清洗是確保其長期穩(wěn)定性和高效分離性能的關鍵步驟即將展開。通過選擇合適的清洗劑大幅增加、優(yōu)化清洗條件以及采用適當的清洗方法,我們可以有效地去除填料表面的污染物和殘留物傳承,恢復其原有的分離能力和使用壽命等特點。
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