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分子分析需要精確的移液試劑和具有不同性質(zhì)的樣品——包括粘性的那些可以堵塞尖端落實落細,分布不均勻和復(fù)雜的再現(xiàn)性。這個Opentrons OT-2是一個自動液體處理機器人提升行動,能夠去除這些困難的液體方法。屬性中的默認(rèn)參數(shù)Opentron協(xié)議PythonAPI優(yōu)化了高效和準(zhǔn)確的處理水試劑。常用的試劑在粘度、蒸發(fā)速率和表面張力等性能方面都有所不同關鍵技術。這些固有的液體特性需要改變的默認(rèn)協(xié)議參數(shù),以滿足對給定工作流的最佳處理深入。本應(yīng)用程序說明重點關(guān)注最佳基于使用基于計算機視覺的方法和重量方法進(jìn)行的測試技術研究,使用中心OT-2自動處理粘性液體的實踐。
粘性液體
粘性液體具有不同的流變特性開展研究,如不同的密度(例如姿勢,油性低,但甘油性高)首要任務,不同的表面張力(例如綠色化。肥皂液含量較低,但汞含量較高)發展,粘性等保持穩定。我們將粘性液體分類,如蜂蜜、甘油和油支撐作用,可能需要專門的移液參數(shù)研學體驗。
表1:粘性液體的表征根據(jù)其分子結(jié)構(gòu)、蒸汽壓和表面張力的不同最為突出。
糖化液體
糖基化液體由糖組成近年來,對移液管尖端壁具有較高的附著力,且相對較高與表1中提到的其他粘性液體類別相比的粘結(jié)力發展目標奮鬥。這些液體的粘度隨稀釋程度的不同而不同。由于這些液體粘在尖端更多的合作機會,減緩了抽吸后取出尖端的速度延伸,并從液體中分配,有助于避免氣泡有效保障、液滴的形成大數據,以及清潔的抽吸和分配。
揮發(fā)性粘稠液體
揮發(fā)性粘性液體是甘油/聚乙二醇和揮發(fā)性溶劑如乙醇或異丙醇原型的一種混合物講實踐。甘油/聚乙二醇的加入增加了粘度數字技術,而揮發(fā)性溶劑增加了蒸汽壓。因此市場開拓,移液管這樣液體時措施,用戶可以使用默認(rèn)的吸入流量用于水。然而要落實好,分配流量需要是減少的為了抵消由于較高的蒸汽壓而造成的滴液問題緊密相關,在吸入后增加一個氣隙是必要的,以確保準(zhǔn)確的移液先進技術。
粘性表面活性劑液體
粘性表面活性劑液體是表面活性劑和粘性糖基化液體的混合物培訓。最流行的粘性表面活性劑是吐溫?20和特里頓?X-100,粘度最高可達(dá)400毫帕卡秒(mPa)宣講手段。這些液體表現(xiàn)出更高的粘附在吸管尖端重要工具,但粘附力較低。粘性表面活性劑必須以較慢的吸流量吸入配套設備,并以最小的抽出速度抽出更優質。需要降低分配流量,使液體有足夠的時間離開移液管尖端的壁推進高水平。
一種補償慢流量的一種方法是使用更長的延遲與兩步分配技術創新。舉個例子,如果你是用GEN2 P300單通道移液管分配200 uL粘性表面活性劑資料,將分配步驟分為兩部分:首先分配?至?廣泛應用,增加液體流向尖端孔的暫停;然后,分配慢于?的50 uL哪些領域,確保增加額外的吹出步驟和較慢的觸摸尖端步驟敢於挑戰。作為快速分配的額外步驟,當(dāng)移液管接觸到井壁時建立和完善,可以實施觸摸分配策略提供了遵循。
油
油表現(xiàn)出與粘性表面活性劑相似的性質(zhì),可以用上述方法來處理穩定發展。油需要完全從墻上滑下來的時間更長基石之一,這意味著移液管需要更長的時間。較慢的提取有助于減少油粘在吸管尖端外壁的損失增持能力,但由于油對尖端的粘附力高于油的粘結(jié)力共同努力,清潔分配油需要更長的液體沉降時間,導(dǎo)致延遲追求卓越。根據(jù)油試劑的死體積損失估計逐漸完善,在吸入和分配步驟后可以實施更長的延遲。觸摸提示分配和觸摸提示功能也是通過增加更快的分配速度來減少損失的好方法合理需求。較慢的吸入和分配是目前主流,較慢的尖端抽出液體,以及較慢的吹出流速是影響粘性液體處理經(jīng)驗和清潔液體移液的關(guān)鍵參數(shù)高質量。
方法
基于液體的流變特性充分發揮、移液管的規(guī)格和所使用的實驗室器皿的輪廓,我們開發(fā)了使用OT-2的粘性液體處理的優(yōu)化策略管理。本研究僅限于視子GEN2單通道移液管的粘性液體處理能力的特性。所實現(xiàn)的液體處理功能是吸入和吸入和分配;當(dāng)復(fù)雜液體混合或形成基礎,不同的工作流程可能需要不同的參數(shù)時提供堅實支撐,參數(shù)可能不起工作。
材料
用不同稀釋的甘油99%(Sigma-Aldrich,G5516)稀釋分子級水的比例(Invitrogen,卡諾稀釋不同稀釋的甘油高質量。10977023).1甘油是一種粘性液體方案,粘度從1mPa到1400mPa,隨稀釋度而不同。因此,我們認(rèn)為甘油是粘性類的代表性液體,可以定性地理解粘度自動化裝置,并與類似粘度的液體進(jìn)行比較。由于甘油的粘度呈指數(shù)級增長應用前景,我們選擇了10%有很大提升空間、90%和99%的甘油進(jìn)行參數(shù)開發(fā)。所有濃度都在15 ml獵鷹管中,10 ml甘油和水的兩種比例:甘油90%可能性更大,甘油10%部署安排。15號管機架適配器放置在7號機架上。測試使用Opentrons GEN2單通道V2.2移液管: P20共享應用、P300和P1000生產能力。我們還使用了P20提示和P300過濾器提示和P1000過濾器提示。采用集成溫度計和濕度計示範推廣。
重量測試方法
重量測試是在一個定制的鉆機上進(jìn)行的堅持好,稱重秤附在OT-2上。比例尺被放置在一個單獨的工作臺上大幅增加,以隔離由OT-2產(chǎn)生的振動特性。甘油的濃度分別為10%,90%和99%分子級水在重量測試臺上進(jìn)行了測試交流研討。. 3體積1uL、10μL和20μL用P20 GEN2移液管測試形式,每體積4次建設應用。P300 GEN2移液管20μL、150μL和300μL日漸深入,每體積10次動力。P1000 GEN2移液管100μL,500μLand 1000μL. 每卷重復(fù)10次互動式宣講。測試的室溫環(huán)境溫度為23°C~32°C效高性,相對濕度為35%~45%。
OT-2的編程設(shè)定參數(shù)為闌尾表A1自動化、Python協(xié)議PAPI2.9中的A1提升、A2和A3,以所需的流量執(zhí)行抽吸不折不扣、分配和吹氣支撐能力。檢測水采用吸入、分配和井噴等默認(rèn)參數(shù)高效利用。
優(yōu)化結(jié)果及討論
預(yù)期選擇的三種濃度分別為99%特征更加明顯、90%和10%的甘油是基于作為粘性液體類的代表的甘油的動態(tài)粘度。甘油的動態(tài)粘度為1.3mPa講理論,10%為168 mPa甘油為90%的可能性,甘油為99%的濃度為893mPa。
圖1顯示服務為一體,針對粘性液體的優(yōu)化參數(shù)顯示出與水處理有更大的相關(guān)性:
圖1中的結(jié)果顯示了使用GEN2 P20、P300和P1000移液管和過濾器的粘性液體服務體系。準(zhǔn)確吸入的關(guān)鍵是具有較慢的流速說服力、足夠的沉降時間和較慢的提取速率。高粘性液體需要較低的吸出時間分析,即使用吸更高的流速表示。然而,補償是非常激烈,不準(zhǔn)確的體積可以吸入由于重力和附著力在尖端競爭力所在。
這些結(jié)果是通過緩慢的抽吸和允許足夠的沉降時間來抽吸液體來克服這些粘附力來實現(xiàn)的。因此領域,柱塞的液體吸入運動與被吸入液體所花費的時間之間的滯后時間可以被沉降時間所克服溝通機製。雖然液體與尖端有很高的親和力,但提取速度更快結(jié)果是關(guān)于尖端周圍的液滴和液體溢出的信息註入新的動力。優(yōu)化后的參數(shù)實現(xiàn)了較慢的針尖提取速度領先水平,導(dǎo)致清潔針尖退出,吸氣體積的高重現(xiàn)性雙重提升,如表2所示戰略布局。
表2:分配粘性液體的最小損失。優(yōu)化后的參數(shù)允許視子GEN2 P20單通道移液管的<損失為0.9%表現明顯更佳,GEN2 P300和視子GEN2 P1000單通道移液管的<損失為0.2%分配后的通道移液管狀態。
第2P20分配損失
通過在尖端的狹窄區(qū)域內(nèi)同步液體的流動來除去多余的液體,從而完全分配尖端內(nèi)的液體指導。此外廣泛認同,減緩尖端的提取速度也有所幫助避免水滴飛濺和卡住。如果液體未混合流動性,粘度沒有變化共同努力,抽吸和分配后的參數(shù)保持不變。如表2所示追求卓越,整個優(yōu)化后的配藥過程顯著減少了移液損失逐漸完善,為反應(yīng)提供了預(yù)期的目標(biāo)體積,從而提高了準(zhǔn)確性合理需求。
結(jié)論
粘性測試結(jié)果驗證了帶有GEN2單通道移液管的OT-2可以處理液體粘度不同廣泛關註,精度與OT-2的水處理能力相當(dāng),精度高發力。優(yōu)化的推薦的參數(shù)和指南提高了OT-2的液體處理性能優勢領先,并幫助確保成功的協(xié)議運行圖2和圖3總結(jié)了粘液類的實現(xiàn)和較低的流量和臨界沉降時間允許粘性液體沉降迎來新的篇章;因此,連續(xù)的步驟推動並實現,如緩慢吹出幫助以減少粘性液體損失薄弱點,使試劑的有效使用和提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如果排氣量對于液體分配來說過低或過高優化程度,則可以在吸氣前實施氣隙粘性液體具有較慢的分配速率積極性,而不是較慢的噴射,以達(dá)到所需的空氣量不斷豐富,將粘性液體推出尖端實施體系,但權(quán)衡是,可以吸出的液體比移液管的最大限度更少各有優勢。這可能不是最適合用于GEN2 P20單通道移液管的情況效果較好。最后,強烈建議在抽吸和分配步驟后進(jìn)行較慢的提取速度持續,以防止液滴粘在尖端和試劑溢出在實驗室器皿中等多個領域。
綜上所述,OT-2產品和服務、GEN2單通道移液管和過濾器尖端可以最佳地處理粘性液體應用擴展,提高協(xié)議的準(zhǔn)確性。
粘性液體處理參數(shù)
處理粘性液體的關(guān)鍵參數(shù)是分配流量前景。如果你正在開發(fā)一種全新的粘性液體的方案進一步意見,第一步是緩慢抽吸并緩慢抽出增幅最大,這樣你就有了一個干凈的抽吸循環(huán)共享應用。較慢的流量和速度導(dǎo)致粘性液體處理。此外標準,你可以以觀察液體半月板未間斷的速度開始分配示範推廣。保持一個穩(wěn)定的半月板會導(dǎo)致清潔的分配和井噴。圖A1說明了與較高流速相關(guān)的問題:即如果爆炸內(nèi)多余的液體沒有被清除即將展開,就會產(chǎn)生死體積大幅增加。較高的流速迫使液體從中心排出,多余的液體粘在尖端的壁上傳承。如果移液管的井噴能力低于尖端內(nèi)部的多余體積進展情況,就會導(dǎo)致死容量。因此綠色化發展,保持一個較低的流速是必要的至關重要。
原文地址:使用中心OT-2的粘性液體處理自動化
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