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如何提高移液準(zhǔn)確度不斷豐富?

簡介
移液是當(dāng)今生命科學(xué)實驗室中最常見的活動之一服務品質。精確測量和轉(zhuǎn)移從微升到毫升的極少量液體需要操作員具有良好的移液技術(shù)背景下,使用經(jīng)過校準(zhǔn)的移液器并選擇適合任何給定協(xié)議的吸頭綜合措施。因此,將移液視為一個系統(tǒng)是一種始終如一地產(chǎn)生準(zhǔn)確結(jié)果的行之有效的方法自然條件≡O計標準?茖W(xué)、培訓(xùn)和不斷的實踐表明互動互補,某些技術(shù)(例如發揮重要帶動作用,吸入角度、吸入和分配速率等)可以提高移液準(zhǔn)確性提升行動。但什么是移液準(zhǔn)確性能力建設?它是如何定義的關註?它是如何計算的研究進展?本文旨在通過提供簡單而清晰的示例并描述“不確定性”一詞及其對移液的影響,以及考慮這種不確定性的重要性連日來,幫助任何移液器用戶理解移液準(zhǔn)確性背后的基本概念和數(shù)學(xué)快速融入。

系統(tǒng)誤差和隨機誤差之間的關(guān)系

移液精度
移液精度衡量移液器使用者提供等于或接近選定體積的液體分配量的能力。分配體積的精度取決于以下因素:

  • 與移液器儀器和吸頭相關(guān)的誤差
  • 樣品中的液體類型(物理和/或化學(xué)性質(zhì))
  • 用戶技術(shù)
  • 環(huán)境影響系統,例如環(huán)境溫度和氣壓
    與移液器儀器和吸頭相關(guān)的誤差
    兩種類型的誤差會影響單個分配體積的質(zhì)量:
    系統(tǒng)誤差
    在移液術(shù)語中增強,系統(tǒng)誤差 (SE) 衡量分配體積與預(yù)期體積的接近程度。
    系統(tǒng)誤差來自儀器本身(移液器)交流等,并且對于每個分配體積都保持相同的值或比例更加廣闊。系統(tǒng)誤差的示例包括使用未校準(zhǔn)的移液器或使用非標(biāo)準(zhǔn)吸頭(例如,加長)提高。一般而言可以使用,系統(tǒng)誤差是可預(yù)測的,因此可以減少(例如紮實,使用校準(zhǔn)的移液器)效高化。系統(tǒng)誤差可以定性地描述為“真實度”。
    隨機誤差
    隨機誤差 (RE) 是分配體積的可重復(fù)性投入力度。在移液術(shù)語中創造,隨機誤差衡量在保持相同實驗條件下,相同數(shù)量的分配體積彼此之間的接近程度貢獻法治。顧名思義設備製造,隨機誤差是不可預(yù)測的,并且對于每個分配體積而言都不相同攻堅克難。
    隨機誤差的例子包括溫度波動和移液技術(shù)管理。隨機誤差可以定性地描述為“精度”方式之一。
    系統(tǒng)誤差和隨機誤差如何影響整體移液精度?精度是系統(tǒng)誤差和隨機誤差的組合(圖 1)新型儲能。

單次分配體積的不確定性
原則上創新能力,移液器用戶應(yīng)校正已知系統(tǒng)誤差的測量值。對于移液而言範圍,這意味著需要從每個分配體積中減去系統(tǒng)誤差求得平衡。此步驟不太實用。
相反引領作用,“單次分配體積的不確定性”考慮了系統(tǒng)誤差和隨機誤差加強宣傳。
它使用以下近似方程計算,此后縮寫為分配體積的不確定性:
分配體積的不確定性 (μL) = | 系統(tǒng)誤差 | + k * 隨機誤差
此方程用于估計單次分配體積的不確定性用的舒心,當(dāng)移液器用戶需要驗證其移液器的性能時很有用技術發展。
在此方程中,k 是擴展因子集成。擴展因子也稱為覆蓋因子重要手段,根據(jù)定義的標(biāo)準(zhǔn)偏差值確定分配體積的置信度。例如穩定性,如果 k = 1像一棵樹,則分配體積的置信度為 68.3%。如果 k = 2去突破,則置信度為 95.5%能運用,如果 k = 3,則置信度為 99.7%智能設備。實際上不可缺少,68% 的置信度從不被推薦,因為它允許“太多”錯誤測量(即分配量過低或過高)特點。另一方面積極回應,99% 的置信度太嚴(yán)格,幾乎沒有失敗的余地向好態勢。在科學(xué)協(xié)議中平臺建設,通常接受 95% 的置信度。在移液中貢獻力量,95% 的置信度意味著使用,如果移液器用戶必須在相同條件下(移液器、吸頭發行速度、技術(shù)和樣品)分配相同體積 20 次更加堅強,則 19 次分配將在可接受的不確定性(置信范圍)內(nèi),并且只有一個分配體積會被拒絕(即分配量過低或過高)性能。

實驗數(shù)據(jù)波動圖

解釋移液中的不確定度
如果移液器的不確定度為 20 ± 2 μL初步建立,則意味著移液器用戶確信實際分配的體積在18 至 22 μL 之間綜合運用。解釋移液不確定度的一種方法是用戶對預(yù)期體積與分配體積的接近程度的最佳估計。

根據(jù)先前的信息的方法,可以確定覆蓋因子是置信水平的函數(shù)體系。以下示例說明了置信水平和重復(fù)次數(shù)在估計平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和不確定度方面的影響帶動產業發展。

移液精度示例
一旦確定了系統(tǒng)誤差和隨機誤差責任製,計算移液中的不確定度就相對簡單且易于理解。
案例 1:標(biāo)稱量程對移液精度的影響
假設(shè)用戶想要估計經(jīng)過校準(zhǔn)的 Rainin XLS+ L-20 移液器的不確定度倍增效應,該移液器使用 10 次重復(fù)(即重復(fù)的單次分配量)輸送 20規則製定、10和 2 μL DI 水。遵循制造商針對此特定 20 μL 移液器發(fā)布的規(guī)格:

實驗結(jié)果數(shù)據(jù)


使用不確定度方程
不確定度 (μL) = | 系統(tǒng)誤差 (μL) | + k* 隨機誤差 (μL)
然后:
如果 V = 20 μL優化服務策略,則不確定度 = | 0.20 (μL) | + k* 0.06 (μL)
如果 V = 10 μL關規定,則不確定度 = | 0.15 (μL) | + k* 0.05 (μL)
如果 V = 2 μL,則不確定度 = | 0.15 (μL) | + k* 0.04 (μL)
如果所需的置信水平為 95%兩個角度入手,分配體積數(shù)為 10 (n = 10)建強保護,則覆蓋率
因子 k = 2。
不確定度 (20 μL) = | 0.20 (μL) | + 2* 0.06 (μL) = 0.32 μL (1.6%)
不確定性 (10 μL) = | 0.15 (μL) | + 2* 0.05 (μL) = 0.25 μL (2.5%)
不確定性 (2 μL) = | 0.15 (μL) | + 2* 0.04 (μL) = 0.23 μL (11.5%)
這些結(jié)果表明創新為先,不確定性與標(biāo)稱容量有關(guān)真正做到。當(dāng)我們將移??液器操作得更接近其最大標(biāo)稱容量 (100% = 20 μL) 時科普活動,即使假設(shè)置信度較高創新延展,相對不確定性也會變得更小。在所給出的示例中長期間,與移液器在 10% 標(biāo)稱容量附近操作時的不確定性相比基本情況,置信度為 95.45% 的 20 μL(100% 標(biāo)稱容量)的不確定性要小七倍。

如果用戶決定降低置信度高端化,會發(fā)生什么情況力量?使用相同條件但置信度為 68%,則 k = 1(再次強調(diào)提單產,不建議將置信度降低到 68%深入實施,因為這會導(dǎo)致給定協(xié)議中出現(xiàn)“太多”失敗)發展空間。
不確定性 (20 μL) = | 0.20 (μL) | + 1 * 0.06 (μL) = 0.26 μL (1.3%)
不確定性 (10 μL) = | 0.15 (μL) | + 1 * 0.05 (μL) = 0.2 μL (2%)
不確定性 (2 μL) = | 0.15 (μL) | + 1 * 0.04 (μL) = 0.19 μL (9.5%)

比較兩組結(jié)果(68% 和 95% 置信度)效果,可以確定不確定性是置信度的函數(shù)。置信度越高足了準備,不確定性越大合作關系。

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