涉及 LC-MS 樣品製備的工作流程

LC-MS 樣品製備通常用於這些工作流程：

1. 蛋白質(zhì)體學(xué)：用於蛋白質(zhì)鑒定長效機製、定量和翻譯後修飾分析。
2. 代謝組學(xué)：研究小分子和代謝途徑全技術方案。
3. 藥物分析：用於藥物發(fā)現(xiàn)分享、藥代動(dòng)力學(xué)和代謝研究。
4. 環(huán)境與食品分析：用於檢測(cè)污染物或殘留物信息化。

LC-MS 樣品製備的最佳方法

固相萃取 (SPE)

固相萃取 (SPE) 是分析實(shí)驗(yàn)室製備樣本的重要技術(shù)方式之一，尤其適用於 LC-MS 等色譜分析。這種方法主要是利用固相固定相從液體樣本中分離分析物新型儲能，在去除乾擾化合物的同時(shí)有效純化和濃縮分析物競爭力所在。 SPE 提高了樣品與色譜法的兼容性，改進(jìn)了定性和定量分析領域，並延長(zhǎng)了分析系統(tǒng)的使用壽命溝通機製。 SPE 以其快速處理和適應(yīng)自動(dòng)化而著稱(chēng)，尤其適用於處理尿液註入新的動力、血液和食品等複雜基質(zhì)樣品領先水平，與液液萃取相比回收率更高。

• 色譜管條件化：通過(guò)溶劑對(duì)色譜柱中的吸附劑進(jìn)行條件化，準(zhǔn)備其有效結(jié)合分析物戰略布局。
• 樣本加載：將樣本引入經(jīng)過(guò)條件化的吸附劑中事關全面。 在這個(gè)階段，分析物會(huì)被捕獲狀態，同時(shí)一些雜質(zhì)也可能附著技術節能。
• 洗滌：清除非特異性結(jié)合的雜質(zhì)，以提高捕獲分析物的純度廣泛認同，並減少分析中的背景干擾國際要求。
• 洗脫與收集：最後，從吸附劑中洗脫分析物全面協議。 如有必要重要部署，對(duì)洗脫液進(jìn)行進(jìn)一步處理，以確保其與LC-MS/MS的相容性工具，然後進(jìn)行分析智慧與合力。

蛋白質(zhì)沉澱

蛋白質(zhì)沉澱是一種廣泛使用的技術(shù)，旨在去除生物樣本中的蛋白質(zhì)重要的角色。這種方法對(duì)於製備蛋白質(zhì)含量較高的樣本（如血漿或血清）至關(guān)重要開放要求。透過(guò)沉澱蛋白質(zhì)，可簡(jiǎn)化樣品基質(zhì)平臺建設，減少對(duì)後續(xù) LC-MS 分析的干擾服務機製。此方法因其簡(jiǎn)單、快速推動並實現、有效而備受青睞薄弱點，可用於處理大量且複雜的生物基質(zhì)。它不僅能改善小分子分析優化程度，還能將可能影響 LC-MS 分析準(zhǔn)確度和靈敏度的基質(zhì)效應(yīng)降至最低積極性。

• 沉澱試劑的添加：向生物樣本中加入沉澱試劑（如乙腈、甲醇或三氟醋酸）不斷豐富，使蛋白質(zhì)變性並聚集實施體系。
• 孵育：允許混合物孵育，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的完全沉澱各有優勢。 此步驟的持續(xù)時(shí)間可能根據(jù)沉澱試劑和樣本類(lèi)型有所不同效果較好。
• 離心：對(duì)樣本進(jìn)行離心，分離沉澱的蛋白質(zhì)與含有分析物的上清液持續。
• 上清液收集：小心收集上清液等多個領域，上清液現(xiàn)在包含了感興趣的分析物，免受蛋白質(zhì)干擾產品和服務。
• 可選後處理：根據(jù)LC-MS分析的具體要求應用擴展，上清液可能會(huì)進(jìn)一步處理體驗區，例如溶劑蒸發(fā)或稀釋。

液-液萃然顒由?。↙LE）

液-液萃取是指根據(jù)分析物在兩種不相溶液體（通常是水相和有機(jī)溶劑）中的溶解度差異將其分離有望。這種方法對(duì)於從複雜的水性基質(zhì)（如生物液體）中提取分析物至關(guān)重要，對(duì)於非極性或中等極性化合物尤其有效導向作用。 LLE 能夠有效分離和濃縮分析物方案，同時(shí)去除水溶性幹?jǐn)_，從而提高 LC-MS 分析的靈敏度和特異性真正做到，因此備受推崇科普活動。此技術(shù)用途廣泛，可根據(jù)不同的樣品量進(jìn)行調(diào)整習慣。

• 相選擇和混合：選擇適當(dāng)?shù)牟豢苫烊苋軇粋€(gè)水相和一個(gè)有機(jī)相充足。 將樣本與這些溶劑混合進展情況，確保分析物優(yōu)先溶解在有機(jī)相中的積極性。
• 相分離：讓混合物靜置，或使用離心加速相分離至關重要。 分析物將分配到有機(jī)溶劑中不久前，而大多數(shù)水相中的雜質(zhì)則留在水層。
• 有機(jī)相收集：小心收集有機(jī)相提升行動，其中包含選取的分析物能力建設。 此步驟需要精確操作，以避免相間交叉污染研究進展。

LC-MS樣品製備中的衍生化

LC-MS 樣品製備中的衍生化是一種化學(xué)修飾過(guò)程無障礙，透過(guò)轉(zhuǎn)化分析物的活性基團(tuán)來(lái)提高其檢測(cè)和定量能力。這種技術(shù)尤其適用於固有檢測(cè)能力較低的分析物快速融入，如缺乏髮色團(tuán)或螢光團(tuán)的分析物認為。衍生化可以改善分析物的理化性質(zhì)，如揮發(fā)性增強、穩(wěn)定性和電離效率重要意義，使其更適合 LC-MS 分析。它對(duì)於分析類(lèi)固醇更加廣闊、胺基酸和醣類(lèi)等特定化合物類(lèi)別至關(guān)重要規劃，可顯著提高靈敏度、選擇性和整體分析性能可以使用。

為什麼LC-MS樣品製備如此困難：

• 基質(zhì)效應(yīng)： 許多樣品進入當下，尤其是生物樣品，都有複雜的基質(zhì)效高化，會(huì)幹?jǐn)_ LC-MS 分析新體系。
• 分析物多樣性： 不同的分析物可能需要不同的製備技術(shù)。
• 靈敏度和特異性： 要達(dá)到必要的靈敏度和特異性，需要仔細(xì)的優(yōu)化長效機製。