在蛋白質(zhì)進(jìn)入結(jié)晶狀態(tài)之前形勢,它們通常處於溶液中的溶解狀態(tài)。在這種狀態(tài)下,蛋白質(zhì)分子分散在整個溶劑(通常是水或緩衝溶液)中堅持先行,可以自由移動結構重塑,但仍可能保持原生的折疊結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)結(jié)晶的目的是將這些分散的蛋白質(zhì)分子從溶液中轉(zhuǎn)變?yōu)橛行虻墓虘B(tài)晶格排列行動力,形成晶體提供有力支撐。找到合適的條件(如濃度、pH 值保供、溫度以及某些鹽類或其他分子的存在)自行開發,促使蛋白質(zhì)分子聚集在一起,形成這種有序的結(jié)構(gòu)責任,從而促進(jìn)這種轉(zhuǎn)變應用情況。
蛋白質(zhì)結(jié)晶是分子生物學(xué)中的關(guān)鍵技術(shù),它使科學(xué)家能夠以原子分辨率觀察蛋白質(zhì)姿勢。這種細(xì)緻入微的觀察方式為生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的各個方面提供了深刻的見解相互融合,包括:
概述:蒸汽擴(kuò)散是一種廣泛應(yīng)用的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法越來越重要的位置,它依賴於蛋白質(zhì)和沉澱劑的緩慢濃縮。 當(dāng)水從蛋白質(zhì)溶液蒸發(fā)到儲層溶液時共同學習,蛋白質(zhì)和沉澱劑的濃度就會新增奮戰不懈。 一旦溶液達(dá)到過飽和,晶體就會形成措施。
設(shè)定: 無論是懸滴法還是坐滴法大大縮短,都是將含有蛋白質(zhì)溶液和沉澱劑混合物的液滴放置在含有較高濃度沉澱劑的儲液器附近。 在懸滴法中緊密相關,液滴被放置在一個倒置的蓋玻片上更默契了,蓋玻片密封在儲液器上。 在坐滴法中培訓,液滴位於儲液器上方密封井內(nèi)的平臺上不合理波動。
機(jī)制:隨著時間的推移,液滴中的水分蒸發(fā)並擴(kuò)散到儲液器中重要工具。 這種蒸發(fā)將蛋白質(zhì)和沉澱物濃縮在液滴中積極拓展新的領域,在有利條件下促進(jìn)結(jié)晶。
概述:在這種方法中更優質,蛋白質(zhì)和沉澱劑直接混合在一起相對開放,系統(tǒng)不受干擾,讓晶體形成脫穎而出。
設(shè)定: 在一個容器中將蛋白質(zhì)溶液與沉澱劑溶液混合拓展應用。
機(jī)制:當(dāng)混合物中的條件變得有利時(通常是由於緩慢蒸發(fā)或由於蛋白質(zhì)分子與沉澱劑之間的特殊相互作用),蛋白質(zhì)分子開始聚集在一起並有序排列結構,形成晶體管理。
概述:這是“批量結(jié)晶”的一種變體,專為非常小的體積設(shè)計能力建設,以防止蒸發(fā)模樣。
設(shè)定: 將少量蛋白質(zhì)和沉澱劑混合在一個孔中,然後用一層油(如石蠟油或矽油)覆蓋服務,以防止蒸發(fā)很重要。
機(jī)制:油層確保液滴內(nèi)的條件隨著時間的推移保持穩(wěn)定。 沒有蒸發(fā)的影響大型,蛋白質(zhì)和沉澱劑可以在受控條件下相互作用服務效率,從而在適當(dāng)?shù)臈l件下實現(xiàn)結(jié)晶。
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