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蛋白質(zhì)結(jié)晶

從蛋白質(zhì)溶液形成蛋白質(zhì)結(jié)晶的過程。然後利用 X 射線晶體學(xué)等技術(shù)來研究蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)深入交流。

在蛋白質(zhì)進(jìn)入結(jié)晶狀態(tài)之前形勢,它們通常處於溶液中的溶解狀態(tài)。在這種狀態(tài)下,蛋白質(zhì)分子分散在整個溶劑(通常是水或緩衝溶液)中堅持先行,可以自由移動結構重塑,但仍可能保持原生的折疊結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)結(jié)晶的目的是將這些分散的蛋白質(zhì)分子從溶液中轉(zhuǎn)變?yōu)橛行虻墓虘B(tài)晶格排列行動力,形成晶體提供有力支撐。找到合適的條件(如濃度、pH 值保供、溫度以及某些鹽類或其他分子的存在)自行開發,促使蛋白質(zhì)分子聚集在一起,形成這種有序的結(jié)構(gòu)責任,從而促進(jìn)這種轉(zhuǎn)變應用情況。


  1. 結(jié)晶前:蛋白質(zhì)溶解在溶液中,沒有固體顆粒組建。 蛋白質(zhì)分子均勻地分散在整個液體中表現。
  2. 結(jié)晶過程中:隨著條件的變化(如由於蒸汽擴(kuò)散)運行好,溶液中的蛋白質(zhì)變得過飽和。 這意味著溶液中的蛋白質(zhì)濃度高於溶解狀態(tài)下的正常濃度可能性更大。 此時部署安排,蛋白質(zhì)分子開始聚集在一起,並以有序的重複模式排列技術,形成固態(tài)晶體推廣開來。
  3. 結(jié)晶後:系統(tǒng)由懸浮在剩餘液體溶液中的固態(tài)蛋白質(zhì)晶體組成。 晶體不僅僅是固體顆粒技術研究,還具有內(nèi)部有序結(jié)構(gòu)重要的。

蛋白質(zhì)結(jié)晶的目的


蛋白質(zhì)結(jié)晶是分子生物學(xué)中的關(guān)鍵技術(shù),它使科學(xué)家能夠以原子分辨率觀察蛋白質(zhì)姿勢。這種細(xì)緻入微的觀察方式為生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的各個方面提供了深刻的見解相互融合,包括:

  • 了解蛋白質(zhì)的功能和機(jī)制:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)往往能揭示其功能。 通過瞭解蛋白質(zhì)中胺基酸的形狀和排列綠色化,研究人員可以推斷蛋白質(zhì)如何與其他分子相互作用不同需求、如何發(fā)揮其功能以及如何調(diào)節(jié)其活性。
  • 藥物設(shè)計:許多藥物通過與蛋白質(zhì)結(jié)合並調(diào)節(jié)其活性來發(fā)揮作用保持穩定。 瞭解蛋白質(zhì)的精確結(jié)構(gòu)有助於設(shè)計能更有效結(jié)合的新藥總之,從而達(dá)到更好的治療效果。 這種方法被稱為基於結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計支撐作用。
  • 了解疾惭袑W體驗。?/b>基因突變會導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,進(jìn)而改變功能最為突出。 通過比較正常蛋白質(zhì)和變異蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)落實落細,研究人員可以深入瞭解許多疾病的分子基礎(chǔ)。
  • 生物技術(shù)應(yīng)用:瞭解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)有助於設(shè)計具有新功能的蛋白質(zhì)高效化,這些蛋白質(zhì)可用於各種生物技術(shù)應(yīng)用製高點項目,如工業(yè)流程中的酶設(shè)計。
  • 進(jìn)化洞見:比較不同物種的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)可以深入瞭解蛋白質(zhì)的進(jìn)化過程和功能保護(hù)範圍和領域。

蛋白質(zhì)結(jié)晶從未如此簡單

OT-2 是一款臺面式液體工作站有所增加,設(shè)計方便靈活,可自動處理許多常見應(yīng)用更高要求。

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蛋白質(zhì)結(jié)晶方法


蒸氣擴(kuò)散

概述:蒸汽擴(kuò)散是一種廣泛應(yīng)用的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法越來越重要的位置,它依賴於蛋白質(zhì)和沉澱劑的緩慢濃縮。 當(dāng)水從蛋白質(zhì)溶液蒸發(fā)到儲層溶液時共同學習,蛋白質(zhì)和沉澱劑的濃度就會新增奮戰不懈。 一旦溶液達(dá)到過飽和,晶體就會形成措施。

設(shè)定:  無論是懸滴法還是坐滴法大大縮短,都是將含有蛋白質(zhì)溶液和沉澱劑混合物的液滴放置在含有較高濃度沉澱劑的儲液器附近。 在懸滴法中緊密相關,液滴被放置在一個倒置的蓋玻片上更默契了,蓋玻片密封在儲液器上。 在坐滴法中培訓,液滴位於儲液器上方密封井內(nèi)的平臺上不合理波動。

機(jī)制:隨著時間的推移,液滴中的水分蒸發(fā)並擴(kuò)散到儲液器中重要工具。 這種蒸發(fā)將蛋白質(zhì)和沉澱物濃縮在液滴中積極拓展新的領域,在有利條件下促進(jìn)結(jié)晶。


大量結(jié)晶

概述:在這種方法中更優質,蛋白質(zhì)和沉澱劑直接混合在一起相對開放,系統(tǒng)不受干擾,讓晶體形成脫穎而出。

設(shè)定:  在一個容器中將蛋白質(zhì)溶液與沉澱劑溶液混合拓展應用。

機(jī)制:當(dāng)混合物中的條件變得有利時(通常是由於緩慢蒸發(fā)或由於蛋白質(zhì)分子與沉澱劑之間的特殊相互作用),蛋白質(zhì)分子開始聚集在一起並有序排列結構,形成晶體管理。


微量批量結(jié)晶

概述:這是“批量結(jié)晶”的一種變體,專為非常小的體積設(shè)計能力建設,以防止蒸發(fā)模樣。

設(shè)定:  將少量蛋白質(zhì)和沉澱劑混合在一個孔中,然後用一層油(如石蠟油或矽油)覆蓋服務,以防止蒸發(fā)很重要。

機(jī)制:油層確保液滴內(nèi)的條件隨著時間的推移保持穩(wěn)定。 沒有蒸發(fā)的影響大型,蛋白質(zhì)和沉澱劑可以在受控條件下相互作用服務效率,從而在適當(dāng)?shù)臈l件下實現(xiàn)結(jié)晶。

資源亮點

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蛋白質(zhì)結(jié)晶為何困難?


  1. 蛋白質(zhì)是複雜的分子追求卓越,具有不同的表面重要性、電荷和構(gòu)形。
  2. 要為特定蛋白質(zhì)的結(jié)晶找到適當(dāng)?shù)臈l件的必然要求,無異於大海撈針高品質。
  3. 輕微的雜質(zhì)也會抑制結(jié)晶。
  4. 有些蛋白質(zhì)本身俱有柔韌性或多種構(gòu)象高質量,使其結(jié)晶具有挑戰(zhàn)性充分發揮。

與手動相比選擇適用,自動化處理蛋白質(zhì)結(jié)晶的優(yōu)勢:


  1. 一致性與重複性: 自動化可減少人為錯誤。
  2. 高通量: 自動化可同時測試數(shù)千種條件設計。
  3. 高效率: 自動化系統(tǒng)可全天候工作業務指導,加快流程。
  4. 節(jié)省資源: 使用較小的體積可減少所需的珍貴蛋白質(zhì)樣本量就此掀開。
  5. 資料管理: 自動化系統(tǒng)通常配備用於資料儲存和分析的整合軟體解決方案長足發展。

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