需要進(jìn)行 BCA 法的工作流程：

• 蛋白質(zhì)純化過程高效利用，以確定產(chǎn)量和純度。
• 凝膠電泳前大部分，確保蛋白負(fù)載量相等深刻變革。
• 蛋白質(zhì)標(biāo)記或修飾前，確保使用了正確量的蛋白質(zhì)更讓我明白了。
• 細(xì)胞培養(yǎng)研究中迎難而上，確定蛋白質(zhì)表現(xiàn)量。

BCA 檢測的最佳方法

標(biāo)準(zhǔn) BCA 法

最適合蛋白質(zhì)濃度範(fàn)圍在測定線性範(fàn)圍內(nèi)探索、樣本數(shù)量適中的常規(guī)應(yīng)用堅持先行。

1. 樣品製備： 首先收集和製備蛋白質(zhì)樣本產業，確保樣本中不含幹?jǐn)_物質(zhì)。
2. 製備 BCA 工作試劑： 這通常包括將 BCA 溶液與硫酸銅（II）溶液以特定比例混合情況較常見，通常由檢測試劑盒製造商提供可持續。
3. 混合與孵育： 通常在比色皿或試管中將蛋白質(zhì)樣本加入 BCA 工作試劑。通常在 37℃下孵育混合物 30 分鐘機製。
4. 測量： 孵育結(jié)束後全過程，使用分光光度計在 562 nm波長處測量每個樣品的吸光度。
5. 分析： 將吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)（通常是牛血清白蛋白 (BSA)）的吸光度值進(jìn)行比較探討，以確定樣本的蛋白質(zhì)濃度。

微孔板 BCA 法

非常適合需要同時分析許多樣品的高通量篩選高效流通。它的試劑使用效率高調解製度，常用於大型研究或工業(yè)環(huán)境。

1. 樣品製備： 與標(biāo)準(zhǔn)檢測一樣功能，首先製備蛋白質(zhì)樣品應用的因素之一。
2. BCA 工作試劑： 製備相同的試劑，但要根據(jù)微孔板孔調(diào)整體積預期。
3. 分裝和孵育： 使用多通道移液管將蛋白質(zhì)樣本和 BCA 工作試劑分裝到 96 孔板的孔中敢於監督。通常在 37℃ 孵育 30 分鐘。
4. 測量： 使用微孔板閱讀器在 562 nm波長處測量吸光度結構。
5. 分析： 與標(biāo)準(zhǔn)方法一樣重要的作用，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定蛋白質(zhì)濃度。

針對含去垢劑樣品的改良 BCA 法

專門用於含有去垢劑的樣本規模最大，因為去垢劑會幹?jǐn)_ BCA 反應(yīng)力度。這種情況常見於從某些細(xì)胞類型或組織中提取蛋白質(zhì)，或研究包埋在膜中的蛋白質(zhì)系統性。

1. 樣品製備： 萃取樣品中的蛋白質(zhì)勇探新路，注意去垢劑的濃度。
2. BCA 工作試劑： 依標(biāo)準(zhǔn)檢測方法配製傳遞。
3. 添加洗滌劑相容性試劑： 這些試劑通常在專門的 BCA 試劑盒中提供試驗，添加這些試劑是為了消除去垢劑的干擾作用。
4. 混合與孵育： 與標(biāo)準(zhǔn)測定一樣開展攻關合作，混合樣品和工作試劑並孵育製度保障。
5. 測量與分析： 使用分光光度計測量吸光度，並透過標(biāo)準(zhǔn)曲線確定蛋白質(zhì)濃度自行開發。

如何實現(xiàn) BCA 法的自動化：

• 液體處理工作站： 這些機(jī)器設(shè)計用於自動將液體移液到指定容器中保護好，確保準(zhǔn)確性和一致性組建。
• 整合系統(tǒng)： 有些平臺整合了從樣品添加到讀取吸光度的整個過程，從而簡化了工作流程特點。
• 軟體： 自動化軟體可用於設(shè)定協(xié)議深刻變革，確保每次檢測都以相同的方式進(jìn)行。

與手動移液相比和諧共生，自動化 BCA 法的優(yōu)點(diǎn)：

• 一致性： 自動化可確保每次都以相同的方式執(zhí)行每個步驟質生產力，從而減少變異性。
• 效率： 自動化系統(tǒng)可同時處理多個樣本技術交流，加速處理速度先進的解決方案。
• 準(zhǔn)確性： 自動移液減少了體積錯誤和交叉污染的風(fēng)險。
• 資料完整性： 自動化系統(tǒng)通常配有整合的資料管理解決方案創造更多，可確保正確記錄和儲存結(jié)果宣講活動。