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使用 Opentrons Flex? 核酸萃取工作站純化從細(xì)胞或組織樣本中提取基因組 DNA

應(yīng)用優(yōu)勢(shì)

使用 Opentrons Flex? 搭配NucleoMag? Tissue 試劑盒,進(jìn)行純化核酸的優(yōu)點(diǎn):

1.方法經(jīng)過驗(yàn)證環境,確保全自動(dòng)提取純化過程準(zhǔn)確性應用前景。 2.產(chǎn)量和純度重複性好與時俱進,穩(wěn)定回收基因組 DNA。 3.處理能力強(qiáng),可同時(shí)處理最多 96個(gè)樣品範圍。 4.可存取 Opentrons 協(xié)定庫或透過MACHEREY NAGEL 的自動(dòng)化技術(shù)支援a(chǎn)[email protected]以取得更多詳細(xì)資訊。

導(dǎo)言

萃取基因組 DNA 是生命科學(xué)和應(yīng)用測試實(shí)驗(yàn)室中常見的實(shí)驗(yàn)流程紮實做,尤其在基因分型測試空間廣闊、定序和臨床研究等下游應(yīng)用中,對(duì) DNA 的品質(zhì)和純淨(jìng)度要求嚴(yán)格臺上與臺下。 MACHEREY NAGEL 的 NucleoMag? Tissue 試劑盒提供了基於磁珠的快速基因組 DNA 純化解決方案用的舒心。此試劑盒設(shè)計(jì)精簡,適用於 96 孔板模式集聚效應,可為 PCR集成、NGS 或其他酵素反應(yīng)提供高品質(zhì)、高純度的 DNA 模板。 結(jié)合 Opentrons Flex? 核酸萃取工作站穩定性,可高效純化 HeLa 細(xì)胞基因組DNA像一棵樹。工作站配備Opentrons Flex? 環(huán)形磁力架、加熱振盪模組去突破,以及5-1000 μL 單通道和8 通道移液器能運用,還可選擇96 通道移液器,適用於各種樣本類型提取DNA具體而言,包括其他真核細(xì)胞或組織工具。 Opentrons Protocol Library 中提供了結(jié)合 Opentrons Flex? 核酸萃取工作站與 NucleoMag? Tissue 試劑盒使用的協(xié)議,可直接下載使用喜愛。

應(yīng)用說明 NucleoMag? 組織與 Opentrons Flex?

NucleoMag? Tissue 試劑盒的原理是基於核酸在特定結(jié)合條件下可逆吸附到 NucleoMag?B-beads 上重要的角色。在處理高達(dá) 20 mg 的組織樣本或 1×10^6 個(gè) 細(xì)胞時(shí),先加入蛋白酶 K 和裂解緩衝液T1向好態勢,然後透過加入緩衝液 MB2 促進(jìn)核酸與磁珠的可逆結(jié)合平臺建設。隨後,在磁珠吸附後貢獻力量,使用洗滌緩衝液 MB3 和 MB4 進(jìn)行洗滌使用,以去除鹽和其他雜質(zhì)。接著進(jìn)行乾燥步驟或進(jìn)行 MB5 洗滌發行速度,最後使用洗脫緩衝液 MB6 將 DNA 洗脫下來更加堅強。所有的移液和磁珠純化步驟都由 Opentrons Flex? 完成。

應(yīng)用資料

應(yīng)用數(shù)據(jù)

從HeLa細(xì)胞中萃取DNA

利用 Opentrons Flex? 工作站搭配 NucleoMag? Tissue 試劑盒性能,成功從2.4×10^5 個(gè) HeLa 細(xì)胞中萃取了高純度 DNA初步建立。透過使 TapeStation 對(duì)純化後的 DNA 進(jìn)行評(píng)估,包括評(píng)估 DNA 完整性(DIN)和片段大小分佈(虛擬凝膠成像)供給,結(jié)果顯示 DNA 的平均 DIN 值為9.0±0.09的方法。這表明 Opentrons Flex? 工作站與 NucleoMag? Tissue試劑盒結(jié)合使用,能夠穩(wěn)定地從 HeLa 細(xì)胞中提取高品質(zhì)的 DNA 進行探討。

值得信賴的 qPCR 檢測結(jié)果

透過進(jìn)行 qPCR 分析(以藍(lán)色條表示)落到實處,使用 PowerTrackTM SYBR GreenMaster Mix 作為試劑,引子經(jīng) IDT 設(shè)計(jì)十分落實,靶向基因組中 β-2- 微球蛋白的一個(gè) 190 bp 區(qū)域倍增效應。 qPCR 結(jié)果顯示,在所有測試樣本中都能穩(wěn)定檢測到擴(kuò)增片段擴大,顯示這個(gè)自動(dòng)化核酸純化流程適用於各種常見的基於酵素的下游應(yīng)用多樣性。這些結(jié)果證明了 Opentrons Flex? 工作站搭配 NucleoMag? Tissue 試劑盒萃取的 DNA 在 qPCR 檢測中表現(xiàn)出可靠性。

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