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使用中心OT-2的黏性液體處理自動化

分子分析需要精確的移液試劑和具有不同性質(zhì)的樣品——包括黏性的那些可以堵塞尖端行動力,分佈不均勻和複雜的再現(xiàn)性過程中。這款Opentrons OT-2是自動液體處理機器人越來越重要的位置,能夠去除這些困難的液體。屬性中的預(yù)設(shè)參數(shù)Opentron協(xié)議PythonAPI優(yōu)化了高效和準確的處理水試劑稍有不慎。常用的試劑在黏度、蒸發(fā)速率和表面張力等性能方面都有所不同。這些固有的液體特性需要改變的預(yù)設(shè)協(xié)定參數(shù)相對較高,以滿足對給定工作流程的最佳處理管理。本應(yīng)用程式說明重點在於最佳基於使用基於電腦視覺的方法和重量方法進行的測試,使用中心OT-2自動處理黏性液體的實踐。

黏性液體黏性液體具有不同的流變特性戰略布局,如不同的密度(例如事關全面,油性低,但甘油性高)狀態,不同的表面張力(例如技術節能。肥皂液含量較低,但汞含量較高)廣泛認同,黏性等國際要求。我們將黏性液體分類,如蜂蜜鍛造、甘油和油競爭激烈,可能需要專門的移液參數(shù)。

表1:黏性液體的表徵依其分子結(jié)構(gòu)改善、蒸氣壓和表面張力的不同空白區。

粘性液體的表征

糖化液體糖基化液體由糖組成,對移液管尖端壁具有較高的附著力是目前主流,且相對較高與表1中提到的其他黏性液體類別相比的黏結(jié)力充分發揮。這些液體的黏度隨稀釋程度的不同而不同。由於這些液體黏在尖端充分發揮,減緩了抽吸後取出尖端的速度選擇適用,並從液體中分配,有助於避免氣泡設計、液滴的形成業務指導,以及清潔的抽吸和分配改進措施。

揮發(fā)性黏稠液體揮發(fā)性黏性液體是甘油/聚乙二醇和揮發(fā)性溶劑如乙醇或異丙醇原型的一種混合物。甘油/聚乙二醇的加入增加了黏度長足發展,而揮發(fā)性溶劑增加了蒸汽壓今年。因此,當移液管這樣液體時結構不合理,使用者可以使用預(yù)設(shè)的吸入流量用於水動手能力。然而,分配流量需要是減少的為了抵消由於較高的蒸汽壓而造成的滴液問題意見征詢,在吸入後增加一個氣隙是必要的提升,以確保準確的移液。

黏性界面活性劑液體黏性界面活性劑液體是表面活性劑和黏性糖基化液體的混合物等多個領域。最受歡迎的黏性界面活性劑是吐溫?20和特里頓?X-100再獲,黏度最高可達400毫帕卡秒(mPa)。這些液體表現(xiàn)出更高的黏附在吸管尖端應用擴展,但黏附力較低體驗區。黏性界面活性劑必須以較慢的吸流量吸入,並以最小的抽出速度抽出活動上。需要降低分配流量有望,使液體有足夠的時間離開移液管尖端的壁面。

一種補償慢流量的一種方法是使用更長的延遲與兩步驟分配生產能力。舉個例子標準,如果你是用GEN2 P300單通道移液管分配200 uL黏性界面活性劑,將分配步驟分為兩部分:首先分配?至?堅持好,增加液體流向尖端孔的暫停即將展開;然後,分配慢於?的50 uL特性,確保增加額外的吹出步驟和較慢的觸摸尖端步驟傳承。作為快速分配的額外步驟,當移液管接觸到井壁時建言直達,可以實施觸摸分配策略多種。

油油表現(xiàn)出與黏性表面活性劑相似的性質(zhì),可以用上述方法來處理充分發揮。油需要完全從牆上滑下來的時間更長發展成就,這意味著移液管需要更長的時間。較慢的提取有助於減少油粘在吸管尖端外壁的損失重要方式,但由於油對尖端的粘附力高於油的粘結(jié)力開展面對面,清潔分配油需要更長的液體沉降時間,導致延遲非常重要。根據(jù)油試劑的死體積損失估計進一步提升,在吸入和分配步驟後可以實施更長的延遲空間廣闊。觸摸提示分配和觸摸提示功能也是透過增加更快的分配速度來減少損失的好方法。較慢的吸入和分配改革創新,較慢的尖端抽出液體知識和技能,以及較慢的吹出流速是影響?zhàn)ば砸后w處理經(jīng)驗和清潔液體移液的關(guān)鍵參數(shù)。

方法基於液體的流變特性新模式、移液管的規(guī)格和所使用的實驗室器皿的輪廓更加廣闊,我們開發(fā)了使用OT-2的黏性液體處理的最佳化策略。本研究僅限於視子GEN2單通道移液管的黏性液體處理能力提高。所實現(xiàn)的液體處理功能是吸入和吸入和分配方便;當複雜液體混合或形成,不同的工作流程可能需要不同的參數(shù)時各領域,參數(shù)可能無法運作。

材料以不同稀釋的甘油99%(Sigma-Aldrich保持競爭優勢,G5516)稀釋分子級水的比例(Invitrogen進行培訓,卡諾稀釋不同稀釋的甘油。10977023).1甘油是一種黏性液體長效機製,黏度從1mPa到1400mPa法治力量,隨稀釋度而不同。因此分享,我們認為甘油是黏性類的代表性液體共享,可以定性地理解黏度,並與類似黏度的液體進行比較方式之一。由於甘油的黏度呈指數(shù)級增長生動,我們選擇了10%、90%和99%的甘油進行參數(shù)開發(fā)創新能力。所有濃度都在15 ml獵鷹管中新品技,10 ml甘油和水的兩種比例:甘油90%,甘油10%求得平衡。 15號管機架轉(zhuǎn)接器放置在7號機架上紮實做。測試使用Opentrons GEN2單通道V2.2移液管: P20、P300和P1000至關重要。我們也使用了P20提示和P300過濾器提示和P1000過濾器提示提供深度撮合服務。採用整合式溫度計和濕度計。

重量測試方法重量測試是在一個客製化的鑽孔機上進行的的發生,稱重秤附在OT-2上組成部分。比例尺被放置在一個單獨的工作臺上,以隔離由OT-2產(chǎn)生的振動狀態。甘油的濃度分別為10%技術節能,90%和99%分子級水在重量測試臺上進行了測試指導。 . 3體積1uL、10μL和20μL用P20 GEN2移液管測試飛躍,每體積4次更高效。 P300 GEN2移液管20μL、150μL和300μL重要部署,每體積10次具體而言。 P1000 GEN2移液管100μL,500μLand 1000μL. 每卷重複10次智慧與合力。測試的室溫環(huán)境溫度為23°C~32°C喜愛,相對濕度為35%~45%。

OT-2的程式設(shè)定參數(shù)為闌尾表A1開放要求、Python協(xié)定PAPI2.9中的A1向好態勢、A2和A3,以所需的流量執(zhí)行抽吸服務機製、分配和吹氣貢獻力量。檢測水採用吸入、分配和井噴等預(yù)設(shè)參數(shù)大幅拓展。

優(yōu)化結(jié)果及討論預(yù)期選擇的三種濃度分別為99%發行速度、90%和10%的甘油是基於作為黏性液體類的代表的甘油的動態(tài)黏度。甘油的動態(tài)黏度為1.3mPa與時俱進,10%為168 mPa甘油為90%性能,甘油為99%的濃度為893mPa。

圖1顯示綜合運用,針對黏性液體的最佳化參數(shù)顯示出與水處理有更大的相關(guān)性:

進行高精度的粘性處理
圖1:使用openteronsgeN2P20供給、P300和P1000移液管進行高精度的黏性處理。這些結(jié)果是透過一個較慢的抽吸率實事求是,引入適當?shù)某翝諘r間的液體完全抽吸重要的意義,和較慢的提取速度導致可比性結(jié)果的水。

圖1的結(jié)果顯示了使用GEN2 P20等多個領域、P300和P1000移液管和過濾器的黏性液體再獲。準確吸入的關(guān)鍵是具有較慢的流速、足夠的沉澱時間和較慢的提取速率應用擴展。高黏性液體需要較低的吸出時間體驗區,即使用吸出較高的流速。然而活動上,補償是有望,不準確的體積可以吸入由於重力和附著力在尖端。

這些結(jié)果是透過緩慢的抽吸和允許足夠的沉降時間來抽吸液體來克服這些黏附力來實現(xiàn)的安全鏈。因此顯示,柱塞的液體吸入運動與被吸入液體所花費的時間之間的延遲時間可以被沉澱時間所克服創新為先。雖然液體與尖端有很高的親和力,但提取速度更快結(jié)果是關(guān)於尖端周圍的液滴和液體溢出的信息科普活動。優(yōu)化後的參數(shù)實現(xiàn)了較慢的針尖提取速度創新延展,導致清潔針尖退出,吸氣體積的高重現(xiàn)性長期間,如表2所示基本情況。

表2:分配黏性液體的最小損失。優(yōu)化後的參數(shù)允許視子GEN2 P20單通道移液管的<損失為0.9%高端化,GEN2 P300和視子GEN2 P1000單通道移液管的<損失為0.2%分配後的通道移液管力量。

第2P20分配損失

第2P20分配損失
第2P300分配損失

透過在尖端的狹窄區(qū)域內(nèi)同步液體的流動來除去多餘的液體,從而完全分配尖端內(nèi)的液體提單產。此外深入實施,減緩尖端的提取速度也有所幫助避免水滴飛濺和卡住。如果液體未混合發展空間,黏度沒有變化研究進展,抽吸和分配後的參數(shù)保持不變。如表2所示連日來,整個優(yōu)化後的配藥過程顯著減少了移液損失,為反應(yīng)提供了預(yù)期的目標體積認為,從而提高了準確性系統。

結(jié)論黏性測試結(jié)果驗證了具有GEN2單通道移液管的OT-2可以處理液體黏度不同,精度與OT-2的水處理能力相當重要意義,精度高交流等。優(yōu)化的建議的參數(shù)和指南提高了OT-2的液體處理性能,並幫助確保成功的協(xié)議運行圖2和圖3總結(jié)了粘液類的實現(xiàn)和較低的流量和臨界沉降時間允許粘性液體沉降規劃;因此提高,連續(xù)的步驟,如緩慢吹出幫助以減少粘性液體損失進入當下,使試劑的有效使用和提高結(jié)果的準確性紮實。

如果排氣量對於液體分配來說過低或過高,則可以在吸氣前實施氣隙粘性液體具有較慢的分配速率新體系,而不是較慢的噴射投入力度,以達到所需的空氣量,將粘性液體推出尖端尤為突出,但權(quán)衡是規定,可以吸出的液體比移液管的最大限度更少。這可能不是最適合用於GEN2 P20單通道移液管的情況空間載體。最後高質量,強烈建議在抽吸和分配步驟後進行較慢的萃取速度相對簡便,以防止液滴黏在尖端和試劑溢出在實驗室器皿中。

綜上所述流程,OT-2合作、GEN2單通道移液管和過濾器尖端可以最佳地處理黏性液體,提高協(xié)議的準確性上高質量。

粘性處理策略:吸氣
使用視中心Python協(xié)議API制定周期分發(fā)策略

黏性液體處理參數(shù)處理黏性液體的關(guān)鍵參數(shù)是分配流量一站式服務。如果你正在開發(fā)一種全新的黏性液體的方案,第一步是緩慢抽吸並緩慢抽出深入交流,這樣你就有了一個乾淨的抽吸循環(huán)引領作用。較慢的流量和速度導致黏性液體處理。此外臺上與臺下,你可以以觀察液體半月板未間斷的速度開始分配用的舒心。保持一個穩(wěn)定的半月板會導致清潔的分配和井噴。圖A1說明了與較高流速相關(guān)的問題:即如果爆炸內(nèi)多餘的液體沒有被清除集聚效應,就會產(chǎn)生死體積集成。較高的流速迫使液體從中心排出,多餘的液體會黏在尖端的壁上互動講。如果移液管的井噴能力低於尖端內(nèi)部多餘的體積穩定性,就會導致死容量。因此過程中,保持一個較低的流速是必要的去突破。

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