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1 引言鑑於對資料可靠性的顧慮落地生根,以及無法重現(xiàn)已發(fā)布的研究結果的特點,生命科學正陷於「重現(xiàn)性危機」之中。大多數(shù)科學研究人員報告未能重現(xiàn)實驗(包括其本人的實驗)有效保障,因此需要採取更多步驟來改善已發(fā)布的研究結果的可靠性與可信度大數據。但是,有哪些因素導致了這種科學“危機”講實踐,應如何實施簡單的移液解決方案來應對這一危機數字技術?本白皮書概述了重現(xiàn)性危機的嚴重程度,探討了造成實驗無法重現(xiàn)的五個主要因素市場開拓,並討論了良好的移液器選擇和技術如何避免因液體處理不準確而導致可重現(xiàn)性差的問題措施。
2 資料重現(xiàn)性危機重現(xiàn)性不僅是特定時間、地點或人物的人為現(xiàn)象要落實好,它也是科學方法的基石緊密相關,是確認所觀察到的結果是否符合假設的必要條件⌒录夹g?茖W界依靠同儕審查出版流程來確惫餐瑢W習?蒲谐晒麥蚀_無誤,這意味著從表面上看深入,大多數(shù)科研成果一經(jīng)發(fā)布便很少受到質(zhì)疑效高。因此,很少有人會重複這些研究基礎,已發(fā)布研究結果即被視為事實性能,而研究領域則可能建立在一個不可重現(xiàn)的研究結果之上多種方式。我們目前專注於減少在科學研究中使用動物進行實驗(例如「3 R」框架,透過動物替代實力增強、動物減少和研究改進來進行更人道的動物研究)體系流動性,而這進一步加劇了這一現(xiàn)象。這個框架建議優(yōu)先考慮「真正進入知識庫」的研究帶來全新智能,但這無法促進現(xiàn)有知識的重現(xiàn)實現了超越。然而,如果特定研究結果無法在不同環(huán)境下由不同人員重現(xiàn)去完善,則我們不能這一結果視為真正的科學現(xiàn)象橋梁作用,只能將其視為特定實驗條件下的產(chǎn)物。
John Ioannidis於2005年發(fā)表了題為「為何大多數(shù)已發(fā)表的研究結果都是錯誤的」(1) 的期刊文章求索,此文頗具爭議讓人糾結,(生物)醫(yī)學領域的可重現(xiàn)性危機由此成為人們關注的焦點。模擬與建模結果表明穩定發展,對於大多數(shù)研究設計而言基石之一,已發(fā)布研究結果很可能是錯誤的,它們只是當前普遍偏差下的準確測量增持能力。
近二十年前就有人提出了資料重現(xiàn)性問題共同努力,如今這一問題仍然普遍存在。近期服務,《自然》的一項調(diào)查結果顯示很重要,70%以上的科學研究人員報告未能重現(xiàn)已發(fā)表的實驗結果 (2)。而令人擔憂的是覆蓋,50%以上的科學研究人員報告未能重現(xiàn)自己的實驗。現(xiàn)在大家一致認為研究,這個問題非常嚴重高效,已經(jīng)導致生物學領域和醫(yī)學領域深陷重現(xiàn)性危機。大多數(shù)研究人員表示提高,儘管自己認同這個觀點機構,但還是相信已發(fā)表的文獻。
重現(xiàn)性危機不僅擾亂了基礎科學的知識庫交流,也嚴重影響了工業(yè)應用的開發(fā)計畫基礎。顯然,我們需要利用解決方案來提高數(shù)據(jù)可靠性和解決科學領域的重現(xiàn)性危機還不大,但有哪些因素會導致缺乏可重現(xiàn)性高產?
3 影響資料重現(xiàn)性的因素想要應對重現(xiàn)性危機,首先要承認科學界存在資料重現(xiàn)性問題發揮作用,然後應該考慮和了解影響資料可靠性的主要因素數據,再在整個實驗過程中(從初始規(guī)劃到實驗程序和最終分析)採取步驟來避免這些因素創新的技術。
3.1 文化可以說,沒有察覺到研究不可重現(xiàn)的主要原因在於顯著,當前科學文化不鼓勵發(fā)表負面研究結果快速增長。科學研究人員無法重現(xiàn)某一實驗通常是因為沒有正確進行實驗占、缺乏必要技能高質量,或是因為可用方法方案的細節(jié)不足以支持重現(xiàn)實驗。然而激發創作,即使在眾多實驗室成員在嘗試多次仍失敗後認為實驗不可重現(xiàn)逐步改善,各雜誌也可能不願意發(fā)表負面研究結果。即使發(fā)表了提升,負面研究結果通常被視為具有爭議且會被反駁大大提高。正如《自然》的調(diào)查結果中所述,「數(shù)位曾公開發(fā)表實驗重現(xiàn)失敗結果的受訪者表示研究成果,編輯和審稿人要求將這些研究和初始研究進行比較取得了一定進展。」但知名期刊認識到了這個問題大面積,因而發(fā)表負面研究結果比以往更容易積極參與,其中包括雜誌PLOS One雜誌的特刊“The Missing Pieces:負面結果、無結果和無法得出結論的研究結果”文章合集(3)培養。
3.2 強調(diào)P值研究中不可重現(xiàn)率較高很可能是因為研究者根據(jù)在單一研究中觀察到的統(tǒng)計顯著性(通常P值小於0.05)聲稱得出結論性結果交流研討。顯著性P < 0.05這一黃金標準也可能導致研究人員錯誤地解讀錯誤的結果,這一標準不一定能夠確認研究結果具有實踐意義和重要意義形式,也無法表明在其他地方進行同一實驗時數(shù)據(jù)是否仍然具有顯著性建設應用。依賴是否達到統(tǒng)計顯著性來認定某項研究是否值得發(fā)表,導致了科學研究人員採取「p值操縱」的做法 (4)日漸深入。這種惡意行為可能包括設計和進行實驗動力,透過資料疏浚、資料捕魚互動式宣講、資料探勘或資料擷取來確保結果具有顯著性或利用資料分析效高性。
3.3 缺乏透明度和原始數(shù)據(jù)僅在最近幾年,才開始鼓勵向研究人員提供研究背後原始數(shù)據(jù)的完全存取權自動化。然而提升,在生物醫(yī)學領域,因為研究成果可以透過商業(yè)化產(chǎn)生巨大財富意向,數(shù)據(jù)收集和分析的具體方式仍然缺乏透明度意料之外。老實說,期刊文章有字數(shù)限制開展面對面,因此在許多情況下難以包含成功重現(xiàn)複雜實驗所需的所有方法細節(jié)系統。而在其他需要考慮商業(yè)前景或智慧財產(chǎn)權前景的領域非常重要,原稿中可能會刪除或混淆專有資訊。如果原始資料本身提供了有價值的產(chǎn)物(例如影響藥物研發(fā)的基因組資料庫)空間廣闊,則這些資料通常會出於商業(yè)原因而處於保密狀態(tài)營造一處。因此,外部研究人員無法獨立驗證已發(fā)表的研究結果知識和技能,因此無法確定該結果是否具有可重現(xiàn)性和結論性取得顯著成效。
3.4 實驗室規(guī)範和記錄保存不當從較為基本的層面來講,實驗不可重現(xiàn)可能是因為初始實驗科研人員和重複實驗科研人員的實驗室技術不佳實現,他們應該盡可能採用標準方式來施用技術不容忽視,以便其他科研人員也可以使用這些技術。如果針對某一特定方案(可能無法透過文字方案來理解)開發(fā)了新技術服務體系,則可以隨附影片教學說服力。細小步驟可能會被忽略,沒有包含在已發(fā)布的方法方案中分析,因此表示,記錄不詳細也會影響可重現(xiàn)性。
3.5 非標準設備的品質(zhì)各異多種可用的實驗室設備和儀器也會影響方案的標準化非常激烈。不同品牌儀器的整體功能也許相似競爭力所在,但其精準度可能各有不同。不同品牌之間靈敏度領域、特異性溝通機製、檢測程度等方面的差異可能會對實驗結果產(chǎn)生顯著影響。因此註入新的動力,需要提供詳細的材料和設備清單以及已發(fā)布的方案領先水平,明確說明所用物品的品牌、型號去完善、批號等資訊橋梁作用。應盡可能使用優(yōu)質(zhì)設備和材料更加廣闊,以減少可能與更廉價材料相關的差異發展成就。設備未經(jīng)校準以及在科研人員不知情的情況下更改實驗參數(shù)都可能會進一步加劇這些問題覆蓋範圍。
4 透過易於實施的移液解決方案來提高重現(xiàn)性重現(xiàn)性危機是一大系統(tǒng)性問題,科學方法的許多階段都需要考慮這個問題並採取解決方案空間廣闊,但可以從改進簡單流程開始來提高數(shù)據(jù)可靠性。改進涉及多個科學工作流程階段的流程可以提高資料可靠性提供深度撮合服務,從而獲得高回報服務品質。
我們的使命是創(chuàng)建可靠且易於驗證的高精度儀器,以幫助研究人員實現(xiàn)可重現(xiàn)的科學組成部分。手動移液是一種容易忽略的生命科學工具影響,這種工具要求準確度要精確到微升級新的動力,可以說在所有過程中都使用得比較多,因此是提高可重現(xiàn)性的關鍵過程發展契機。幸運的是廣泛關註,移液解決方案操作簡單且經(jīng)濟實惠,對整個工作臺工作流程中都有著正面影響發力。
4.1 選擇優(yōu)質(zhì)移液器如要實現(xiàn)可重現(xiàn)移液優勢領先,要先選擇在整個移液循環(huán)(吸液和分液)中都準確無誤的優(yōu)質(zhì)移液器。移液管的真實值(亦稱為準確度)是指吸取並分配接近容量設定所示的真實值或標稱值溶液容量的能力共創美好。移液器的精度是指在多次重複操作中分配相同容量溶液的能力推動並實現。因此,可以透過平衡高真實值和/或高精度來實現(xiàn)移液器的整體移液性能覆蓋範圍,從而分別實現(xiàn)低系統(tǒng)誤差和/或低隨機誤差優化程度。
選擇優(yōu)質(zhì)移液管後,仍有多種因素會對準確度產(chǎn)??生負面影響:
所選移液器應採用先進的製造工藝數據,以達到能維持長期準確(真實值和精度)的允差創新的技術。購買新的移液器時,應比較供應商之間所述的系統(tǒng)誤差規(guī)格和隨機誤差規(guī)格顯著。為說明不同品牌之間的差異快速增長,表1比較了2 μL、20 μL占、200 μL和1000 μL 標稱值範圍內(nèi)高階移液管和低端移液管之間的技術規(guī)格高質量。整體而言,高端儀器的隨機誤差性能更佳激發創作。此外的方法,應特別注意低容量移液器— 即分液容量小於10 μL的移液器,因為移液技術和樣品黏度對低容量分液的負面影響較大進行探討,會導致準確度降低和預期容量減小落到實處。因此,使用者應選擇出廠時儀器誤差較小的移液器最新。
對於精度和重複性要求較高的分子工作流程(如逆轉錄-聚合酶鏈反應技術創新,RT-PCR)來說,劣質(zhì)儀器相對較低的精度會對實驗的可重現(xiàn)性產(chǎn)生顯著影響重要作用。
4.2 確保正確實施日常維護持續向好、校準與性能驗證移液器是實驗室中廣泛使用的設備,經(jīng)常遭受磨損。移液器由多種機械零件構成進展情況,這些零件彼此可以移動的積極性,經(jīng)常接觸到腐蝕性化學物質(zhì)或有害化學物質(zhì)。和所有其他機械性產(chǎn)品一樣至關重要,移液器零件會隨著時間的推移而劣化不久前,進而嚴重影響移液管性能。高端的移液器和儀器可以保證比低價的替代品更經(jīng)久耐用背景下,但它們?nèi)匀恍枰ㄆ诰S護綜合措施、驗證和校準,以確保在實驗中保持一致的性能和可重現(xiàn)性自然條件。
移液器維護移液管維護包括日常保養(yǎng)和預防性維護設計標準。妥善保養(yǎng)移液管可盡量提高維修間隔期間的效能、防止移液管因損壞而無法使用互動互補“l揮重要帶動作用?梢赃M行簡單的日常活動意料之外,以確保移液器正常運作文化價值。
定期檢查移液管是否有任何可見的損壞跡象,例如移液管外殼有刮痕或破損置之不顧。這項活動可以指示移液管是否掉落不斷完善,移液管掉落可能會導致?lián)p壞,並且需要維修或校準方便。
定期清潔移液器基礎上,以防灰塵或污垢進入工作件,進而導致工作件摩擦或卡住傳遞。使用製造商建議的無磨蝕性清潔溶液清潔移液器融合,然後使用無絨布擦拭移液器。
正確消毒移液器(將暴露在紫外光下的時間限制在10-15分鐘)相關性,以免移液器外殼的完整性受損完成的事情。持續(xù)高壓滅菌導致移液器經(jīng)常暴露在高溫、高壓和高濕度條件下穩定,這也可能影響其性能改造層面,因此應在每次高壓滅菌後進行性能驗證。
安全存放移液器優勢與挑戰,將其置於適當?shù)暮醒b或平臺裝置中新體系,以防掉落和損壞。
切勿倒置移液管(液體處理期間)創造,以免液體進入儀器。濾芯吸頭有助於防止液體和污染物進入移液管貢獻法治。
日常保養(yǎng)移液器有助於在維修間隔期間維持移液器性能設備製造,但預防性維護對於防止移液器突然故障仍然至關重要發展需要。 Rainin服務數(shù)據(jù)顯示,如果沒有進行任何預防性維護或執(zhí)行定期維修程序管理,那麼即使每年都進行檢查顯示,移液器的故障率仍會達20%或以上。大約95%的移液器故障都是因為密封系統(tǒng)缺陷效率和安,這種故障可以預測設計能力,也可以預防。預防性維護旨在更換磨損的組件(例如O形環(huán)深入開展、密封件和柱塞)更為一致,以免其發(fā)生故障並進一步損壞周圍部件。
根據(jù)製造商的建議和我們的豐富經(jīng)驗技術的開發,在正常使用條件下研究與應用,密封件應每年至少更換一次,而吸頭支架和活塞應每三到五年更換一次更高效。預防性維護有助於確保維持移液器效能全面協議、防止移液器故障和維持實驗合規(guī)和可重現(xiàn),進而避免工作流程中斷具體而言。
校準建議每年至少進行一次預防性維護工具,以確保移液器功能操作正常,但需要增加移液管的校準頻率發揮重要作用,以確保其準確度保持在(亞)微升級醒悟。真實的吸液量和分液量無從知曉,因此移液器校準不當會顯著降低實驗的可重現(xiàn)性去突破,進而導致已發(fā)布的實驗方案不準確能運用。
經(jīng)驗豐富的服務團隊和強大的生產(chǎn)支援團隊為客戶提供無憂的訂單服務。