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C18色譜管柱全數十八烷基矽烷鍵結矽膠層析管柱力度,是一種反相層析管柱預期。其中「C18」指的是固定相的化學結構,即色譜柱填料為十八烷基矽烷鍵結相相對開放,這種色譜柱的固定相是經由化學鍵結的十八烷基官能基吸附在矽膠基質上的。 C18色譜柱的原理是基於化合物在C18填充物表面上的親疏水性差異取得了一定進展,透過溶劑梯度洗脫來實現化合物的分離等特點。具體來說服務體系,非極性載體表面具有疏水特性,能夠吸附非極性化合物開放以來,而偏極性的流動相中通常包含有機溶劑和緩衝液占,其極性較高,在分離中發(fā)揮重要作用提供了有力支撐。
一激發創作、新管柱活化1、沖洗:新管柱使用前需以純有機試劑(如甲醇進一步意見、乙腈)低流速沖洗增幅最大,沖洗體積以20倍柱體積為宜,以便固定相能充分潤濕生產能力、碳鏈能舒展標準,使色譜管的性能達到最佳狀態(tài)。 2.防脫殼處理:將新柱浸入純甲醇或乙腈溶液中堅持好,旋轉或以其它方式使其表面完全接觸至少30分鐘即將展開。洗去大部分殘留有機物之後,用純水或75%甲醇或乙腈沖洗2~3次直到輸出液為無色無味特性。 3.酸鹼洗處理:在防脫殼處理完成後傳承,使用0.11%的醋酸溶液滴於色譜柱表面並停留約30分鐘,並徹底用DI水沖洗乾淨建言直達。再以0.11%的氨水溶液吸附含氨基的樣品於管柱上並停留約30分鐘多種,之後再以DI水推出至輸出穩(wěn)定。 4.梯度洗脫:加入摩爾比1:1的異丙醇和甲酸製成的混合液進管柱中支撐作用,在流速為0.5 mL/min的條件下梯度洗脫(10% B日漸深入,3min;40% B綜合措施, 3min可靠保障;95% B,3min設計標準,重置至10%過渡三分鐘)開展,使其開放性自由膠體的更快恢復。
二發揮重要帶動作用、日常使用1意向、樣品處理:確保樣品經過適當處理意料之外,去除雜質及乾擾物質,以提高分離效果形式。 2.流動相選擇:依實驗要求選擇適當的流動相組成與比例置之不顧。 3.流速控制:控制適當的流速,避免過高或過低的流速影響分離效果數字化。 4.壓力監(jiān)測:在使用過程中方便,注意監(jiān)測色譜柱的壓力變化,及時發(fā)現並處理異常狀況各領域。
三應用領域、維護1、沖洗層析管:每日實驗結束後進行培訓,應沖洗層析管柱發展機遇,尤其是流動相中含有酸或鹽時,需將層析管中的酸或鹽沖洗乾淨法治力量,通常建議以10%甲醇水沖洗20倍柱體積全技術方案。 2.避免高水相條件:由於C18柱(極性改質處理的除外)的固定相疏水性較強,在使用過程中盡量不要使用高水相條件共享,若水相比例過高分析,易引起固定相疏水塌陷,導致柱效快速下降全面闡釋,甚至造成不可逆的負面影響非常激烈。建議使用過程中水相比例不超過90%。 3.再生處理:當色譜管壓力升高引人註目、管柱性能下降時領域,通常為色譜管柱被污染,對色譜管進行再生處理可恢復部分管柱效好宣講。
四註入新的動力、長期保存1、沖洗:長期保存前要將層析管沖洗3~4小時以上雙向互動。 2.保存溶劑:保存在純有機試劑或高比例的有機試劑溶液(如90%甲醇水)中效率和安。若第二天需繼續(xù)使用,日常保存溶劑也盡量與此相同品牌。
五深入開展、注意事項1、避免劇烈震動:以免損壞色譜管等形式。 2.防止乾燥:長期不使用時技術的開發,應確保色譜管內充滿適當的溶劑,並封好兩端堵頭,以防止乾燥和污染更高效。 3.使用壽命:C18色譜管柱的使用壽命約為100~200次全面協議,當輸出結果的峰形變得模糊、輸出穩(wěn)定性下降時具體而言,請及時更換新柱工具。
六、常見問題與解決方案1喜愛、鹽析問題:使用C18色譜管柱時廣泛關註,可能會出現鹽析現象。這通常是由於流動相中的鹽類物質在色譜柱中析出所致發力。為了解決這個問題,可以採取優(yōu)化流動相組成迎來新的篇章、使用耐高鹽的比例閥或加裝柱溫箱等措施共創美好。
2.色譜管阻塞:色譜管阻塞是另一個常見問題。這可能是由於流動相中的雜質薄弱點、樣品中的不溶性物質或緩衝鹽類物質在色譜柱中沉積所致覆蓋範圍。為了解決這個問題,可以採取使用高水相進行沖洗積極性、使用保護柱或柱前過濾器等措施來防止堵塞的發(fā)生奮勇向前。如果色譜管已經阻塞,可以嘗試使用反沖或超音波清洗等方法進行恢復實施體系。但請注意組建,柱芯和某些類型
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