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C18填料怎麼清洗強大的功能? C18填料是一種常用的反相層析填料像一棵樹,廣泛應(yīng)用於液相層析分析。由於其表面具有長(zhǎng)鏈烷基向好態勢,容易吸附樣品中的雜質(zhì),因此定期清洗C18填料是確保其分離性能的重要步驟。
一、常規(guī)清洗方法1更默契了、溶劑沖洗:使用適當(dāng)?shù)募內(nèi)軇ㄈ缂状肌⒁译娴龋┮赃m當(dāng)?shù)牧魉伲ㄍǔ?~2 mL/min)以層析管進(jìn)行沖洗培訓。沖洗時(shí)間可依層析管的污染程度及需要達(dá)到的沖洗效果調(diào)整順滑地配合,一般為15~30分鐘。此方法適用於色譜柱表面沒有明顯污染的情況效高,可有效清除柱子內(nèi)部的雜質(zhì)。 2.溶劑梯度沖洗:採(cǎi)用不同比例的有機(jī)溶劑和水作為流動(dòng)相基礎,透過(guò)逐漸改變?nèi)軇┑谋壤齺?lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)色譜柱的沖洗性能。初始時(shí)採(cǎi)用較低比例的有機(jī)溶劑(如80%的有機(jī)溶劑濃度),然後逐漸增加有機(jī)溶劑的比例至100%對外開放。溶劑的比例和流速應(yīng)保持穩(wěn)定技術創新,以確保沖洗效果的均勻性。此方法適用於色譜管污染較嚴(yán)重的情況資料,可以更徹底清除色譜管柱中的殘留物廣泛應用。
二、針對(duì)特定污染的清洗方法1橫向協同、緩衝鹽析出造成的污染:若使用在有機(jī)相中不易溶的緩衝鹽(如磷酸鹽等)導(dǎo)致析出堵柱哪些領域,可先用60℃左右的熱水以低流速長(zhǎng)時(shí)間沖洗層析管。若緩衝鹽在色譜管中析出不斷創新,也可嘗試增加柱溫求索,使用大比例水相或純水相長(zhǎng)時(shí)間沖洗讓人糾結。最常規(guī)的做法是用5%甲醇(或乙腈)水溶液沖洗10個(gè)管柱體積,以清除緩衝鹽和極性化合物殘留穩定發展。 2.常規(guī)有機(jī)污染:先用5%甲醇(乙腈)水溶液沖洗10個(gè)管柱體積基石之一,將緩衝鹽和層析管柱中一些極性化合物沖乾淨(jìng)。然後用純甲醇或純乙腈沖洗10~20個(gè)管柱體積增持能力,將一些疏水性的雜質(zhì)沖洗乾淨(jìng)共同努力。若壓力仍高,可適當(dāng)降低流速並延長(zhǎng)沖洗時(shí)間追求卓越。若上述方法無(wú)效逐漸完善,可選擇異丙醇(或四氫呋喃)沖洗10~20個(gè)管柱體積。 3.蛋白肽阻塞:可在清洗流動(dòng)相中加入0.1%的三氟乙酸(TFA)覆蓋,以增強(qiáng)對(duì)吸附蛋白質(zhì)的洗脫能力異常狀況。若問題仍無(wú)法解決,可嘗試在色譜柱內(nèi)注入100μL三氟乙醇高效,對(duì)於舊柱子應用創新,可適當(dāng)增加註入次數(shù),以清洗掉強(qiáng)保留的蛋白質(zhì)機構。
三的特性、層析管的再生與反接1、再生:使用一系列溶劑(如10%甲醇基礎、乙腈提供堅實支撐、異丙醇等)以低流速?zèng)_洗層析管柱,每個(gè)溶劑沖洗一段時(shí)間(如4小時(shí))高產,共計(jì)20小時(shí)信息化技術。再生過(guò)程中應(yīng)注意連接方式及防止污染物污染檢測(cè)池。 2.反接:將層析管柱反接良好,以乙腈等溶劑以低流速?zèng)_洗一段時(shí)間(如6小時(shí))逐步顯現。反接是色譜管報(bào)廢前最後的掙扎,反接後不可再正接使用引領。
四自動化裝置、注意事項(xiàng)1、溶劑選擇:確保使用的溶劑為色譜級(jí)應用前景,使用前超音波除氣泡有很大提升空間。 2.流速控制:在沖洗過(guò)程中,應(yīng)根據(jù)色譜管柱的耐受壓力和溶劑的黏度來(lái)選擇適當(dāng)?shù)牧魉佟?3.柱溫控制:清洗過(guò)程中激發創作,可適當(dāng)提高柱溫以增強(qiáng)清洗效果前景。 4.避免鹽類污染:長(zhǎng)期封存時(shí)避免使用含有鹽的流動(dòng)相,因?yàn)辂}在封存過(guò)程中可能會(huì)對(duì)色譜管造成損害。 5.定期維護(hù):定期對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗和維護(hù)大大提高,以延長(zhǎng)其使用壽命並保持分離效果的必然要求。
C18填料的清洗是確保其長(zhǎng)期穩(wěn)定性和高效分離性能的關(guān)鍵步驟。透過(guò)選擇合適的清潔劑取得了一定進展、優(yōu)化清洗條件以及採(cǎi)用適當(dāng)?shù)那逑捶椒ㄍ晟坪?,我們可以有效地去除填料表面的污染物和殘留物,恢?fù)其原有的分離能力和使用壽命積極參與。
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