需要高通量篩選的工作流程

高通量篩選的主要目標(biāo)是透過(guò)快速分析大量潛在的生物調(diào)節(jié)劑來(lái)確定那些對(duì)特定標(biāo)靶具有預(yù)期效果的調(diào)節(jié)劑新的動力，從而簡(jiǎn)化藥物發(fā)現(xiàn)過(guò)程的過程中。 HTS 通常用於以下工作流程：

• 藥物發(fā)現(xiàn)： 確定與特定生物標(biāo)靶相互作用的潛在候選藥物。
• 功能基因體學(xué)： 了解基因功能並確定在特定途徑中發(fā)揮作用的基因像一棵樹。
• 毒理學(xué)： 評(píng)估各種化合物的潛在毒性過程中。
• 通路分析： 確定特定細(xì)胞通路中的關(guān)鍵角色。

高通量篩選過(guò)程概述

步驟 1：樣本和化合物庫(kù)彙編

這一步驟需要選擇與生物相關(guān)的靶點(diǎn)能運用，通常是已知在疾病或其他相關(guān)過(guò)程中發(fā)揮作用的蛋白質(zhì)或細(xì)胞路徑達到。同時(shí)，也要?jiǎng)?chuàng)建或採(cǎi)購(gòu)各種化合物不可缺少。這些化合物的數(shù)量從數(shù)千種到數(shù)百萬(wàn)種不等蓬勃發展，它們構(gòu)成了 “化合物庫(kù)”，將用於篩選針對(duì)目標(biāo)的潛在活性積極回應。

步驟 2：開發(fā)與高通量相容的檢測(cè)方法

HTS 流程的核心是設(shè)計(jì)和應(yīng)用有效的檢測(cè)方法重要性。這不是普通的測(cè)試；它是精心定制的平臺建設，用於衡量庫(kù)中化合物對(duì)指定生物靶點(diǎn)的影響服務機製。要在 HTS 環(huán)境中發(fā)揮有效作用，檢測(cè)方法必須對(duì)最微小的變化具有超靈敏度使用，並能靈活管理大量樣品大幅拓展。此外發行速度，在向自動(dòng)化過(guò)渡的過(guò)程中，還需要針對(duì)讀板器等設(shè)備對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行最佳化與時俱進，這通常意味著檢測(cè)方法需要針對(duì) 96 孔板或 384 孔板等格式進(jìn)行客製化性能。除此之外，確保檢測(cè)在大量樣品中的穩(wěn)定性和可重複性也至關(guān)重要綜合運用。

• 基於細(xì)胞的檢測(cè)：在這裡供給，活細(xì)胞佔(zhàn)據(jù)中心位置。 在這些細(xì)胞內(nèi)對(duì)化合物進(jìn)行測(cè)試實事求是，以確定其效果進行探討，無(wú)論是對(duì)細(xì)胞健康、增殖還是獨(dú)特的細(xì)胞反應(yīng)服務水平。
• 生化試驗(yàn)：進(jìn)一步放大最新，這些試驗(yàn)使用純化的蛋白質(zhì)或特定的生物大分子來(lái)確定化合物的影響。 通常處理方法，這可以是酶動(dòng)力學(xué)探索或細(xì)微的結(jié)合試驗(yàn)重要作用。
• 表型測(cè)定：從更廣闊的視角來(lái)看，這些試驗(yàn)深入到整個(gè)生物體的領(lǐng)域習慣。 通過(guò)將化合物引入斑馬魚或高麗魚等實(shí)體充足，研究人員可以監(jiān)測(cè)錶型的任何顯著變化。

步驟 3：自動(dòng)化基礎(chǔ)設(shè)施設(shè)置

由於樣品和化合物的數(shù)量龐大建強保護，人工處理是不切實(shí)際的同期。因此，需要配置專門的移液工作站來(lái)實(shí)現(xiàn)流程自動(dòng)化真正做到。這些工作站可以處理從精確分配樣品和化合物的量到在微孔板之間轉(zhuǎn)移液體等各種任務(wù)科普活動。整個(gè)裝置的設(shè)計(jì)旨在最大限度地減少誤差、提高速度強化意識，並確保對(duì)每個(gè)樣品進(jìn)行一致的處理。

步驟 4：資料收集與分析

使用檢測(cè)方法篩選化合物後基本情況，會(huì)產(chǎn)生大量數(shù)據(jù)現場。自動(dòng)讀板機(jī)、影像系統(tǒng)或其他偵測(cè)方法可用於收集這些資料力量。然後我有所應，專業(yè)軟體會(huì)處理這些信息，並對(duì)其進(jìn)行分析深入實施，找出顯示出預(yù)期效果的化合物至關重要，即 “命中 ”化合物。這一步至關(guān)重要效果，因?yàn)樗鼮樵谶@些有前景的化合物基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)一步研究和優(yōu)化奠定了基礎(chǔ)有所應。