涉及 LC-MS 樣品製備的工作流程

LC-MS 樣品製備通常用於這些工作流程：

1. 蛋白質(zhì)體學(xué)：用於蛋白質(zhì)鑒定、定量和翻譯後修飾分析深入。
2. 代謝組學(xué)：研究小分子和代謝途徑問題。
3. 藥物分析：用於藥物發(fā)現(xiàn)、藥代動(dòng)力學(xué)和代謝研究全會精神。
4. 環(huán)境與食品分析：用於檢測(cè)污染物或殘留物系統穩定性。

LC-MS 樣品製備的最佳方法

固相萃取 (SPE)

固相萃取 (SPE) 是分析實(shí)驗(yàn)室製備樣本的重要技術(shù)，尤其適用於 LC-MS 等色譜分析集中展示。這種方法主要是利用固相固定相從液體樣本中分離分析物實力增強，在去除乾擾化合物的同時(shí)有效純化和濃縮分析物。 SPE 提高了樣品與色譜法的兼容性探索創新，改進(jìn)了定性和定量分析重要工具，並延長(zhǎng)了分析系統(tǒng)的使用壽命。 SPE 以其快速處理和適應(yīng)自動(dòng)化而著稱配套設備，尤其適用於處理尿液、血液和食品等複雜基質(zhì)樣品相對開放，與液液萃取相比回收率更高推進高水平。

• 色譜管條件化：通過溶劑對(duì)色譜柱中的吸附劑進(jìn)行條件化，準(zhǔn)備其有效結(jié)合分析物。
• 樣本加載：將樣本引入經(jīng)過條件化的吸附劑中生產創效。 在這個(gè)階段結構，分析物會(huì)被捕獲，同時(shí)一些雜質(zhì)也可能附著優化上下。
• 洗滌：清除非特異性結(jié)合的雜質(zhì)能力建設，以提高捕獲分析物的純度，並減少分析中的背景干擾生產體系。
• 洗脫與收集：最後服務，從吸附劑中洗脫分析物。 如有必要能力和水平，對(duì)洗脫液進(jìn)行進(jìn)一步處理覆蓋，以確保其與LC-MS/MS的相容性，然後進(jìn)行分析研究。

蛋白質(zhì)沉澱

蛋白質(zhì)沉澱是一種廣泛使用的技術(shù)高效，旨在去除生物樣本中的蛋白質(zhì)。這種方法對(duì)於製備蛋白質(zhì)含量較高的樣本（如血漿或血清）至關(guān)重要提高。透過沉澱蛋白質(zhì)機構，可簡(jiǎn)化樣品基質(zhì)，減少對(duì)後續(xù) LC-MS 分析的干擾交流。此方法因其簡(jiǎn)單協調機製、快速、有效而備受青睞充分發揮，可用於處理大量且複雜的生物基質(zhì)高質量。它不僅能改善小分子分析，還能將可能影響 LC-MS 分析準(zhǔn)確度和靈敏度的基質(zhì)效應(yīng)降至最低選擇適用。

• 沉澱試劑的添加：向生物樣本中加入沉澱試劑（如乙腈管理、甲醇或三氟醋酸），使蛋白質(zhì)變性並聚集業務指導。
• 孵育：允許混合物孵育改進措施，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的完全沉澱。 此步驟的持續(xù)時(shí)間可能根據(jù)沉澱試劑和樣本類型有所不同長足發展。
• 離心：對(duì)樣本進(jìn)行離心今年，分離沉澱的蛋白質(zhì)與含有分析物的上清液。
• 上清液收集：小心收集上清液結構不合理，上清液現(xiàn)在包含了感興趣的分析物動手能力，免受蛋白質(zhì)干擾。
• 可選後處理：根據(jù)LC-MS分析的具體要求意見征詢，上清液可能會(huì)進(jìn)一步處理提升，例如溶劑蒸發(fā)或稀釋大大提高。

液-液萃取（LLE）

液-液萃取是指根據(jù)分析物在兩種不相溶液體（通常是水相和有機(jī)溶劑）中的溶解度差異將其分離研究成果。這種方法對(duì)於從複雜的水性基質(zhì)（如生物液體）中提取分析物至關(guān)重要取得了一定進展，對(duì)於非極性或中等極性化合物尤其有效。 LLE 能夠有效分離和濃縮分析物大面積，同時(shí)去除水溶性幹?jǐn)_積極參與，從而提高 LC-MS 分析的靈敏度和特異性，因此備受推崇培養。此技術(shù)用途廣泛交流研討，可根據(jù)不同的樣品量進(jìn)行調(diào)整。

• 相選擇和混合：選擇適當(dāng)?shù)牟豢苫烊苋軇粋€(gè)水相和一個(gè)有機(jī)相推動。 將樣本與這些溶劑混合相對較高，確保分析物優(yōu)先溶解在有機(jī)相中。
• 相分離：讓混合物靜置信息，或使用離心加速相分離相關。 分析物將分配到有機(jī)溶劑中，而大多數(shù)水相中的雜質(zhì)則留在水層傳承。
• 有機(jī)相收集：小心收集有機(jī)相等特點，其中包含選取的分析物。 此步驟需要精確操作多種，以避免相間交叉污染將進一步。

LC-MS樣品製備中的衍生化

LC-MS 樣品製備中的衍生化是一種化學(xué)修飾過程，透過轉(zhuǎn)化分析物的活性基團(tuán)來提高其檢測(cè)和定量能力發展成就。這種技術(shù)尤其適用於固有檢測(cè)能力較低的分析物成就，如缺乏髮色團(tuán)或螢光團(tuán)的分析物。衍生化可以改善分析物的理化性質(zhì)開展面對面，如揮發(fā)性系統、穩(wěn)定性和電離效率，使其更適合 LC-MS 分析進一步提升。它對(duì)於分析類固醇空間廣闊、胺基酸和醣類等特定化合物類別至關(guān)重要，可顯著提高靈敏度改革創新、選擇性和整體分析性能知識和技能。

為什麼LC-MS樣品製備如此困難：

• 基質(zhì)效應(yīng)： 許多樣品，尤其是生物樣品新模式，都有複雜的基質(zhì)實現，會(huì)幹?jǐn)_ LC-MS 分析。
• 分析物多樣性： 不同的分析物可能需要不同的製備技術(shù)組織了。
• 靈敏度和特異性： 要達(dá)到必要的靈敏度和特異性的可能性，需要仔細(xì)的優(yōu)化不要畏懼。