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質(zhì)譜分析

一種測量離子質(zhì)荷比的分析技術(shù)堅持先行。其目的是透過測量氣相離子的質(zhì)荷比和豐度來確定樣品中存在的化學物質(zhì)的數(shù)量和類型。

需要質(zhì)譜分析的工作流程:

  • 蛋白質(zhì)鑑定與表徵:確定蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)和翻譯後修飾指導。
  • 定量蛋白質(zhì)體學:量測不同樣本之間蛋白質(zhì)表達水準的變化著力增加。
  • 小分子分析:包括藥物代謝研究智能化、殘留分析、環(huán)境污染物檢測處理。

進行質(zhì)譜分析的方法:


MALDI-TOF(基質(zhì)輔助雷射解吸/電離--飛行時間質(zhì)譜建設,Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization – Time of Flight)

MALDI-TOF 是一種 「軟電離 」技術(shù)前來體驗,非常適合分析蛋白質(zhì)和勝肽等大型生物分子,而不會造成碎裂不斷進步。透過將樣品與基質(zhì)混合並使用雷射脈衝,它可以使樣品離子化效率。它的主要優(yōu)勢在於能夠快速分析大分子,因此在蛋白質(zhì)體學和微生物鑑定方面特別有用新趨勢。

電噴霧電離(Electrospray Ionization, ESI)

ESI 的工作原理是將樣品溶液通過高壓針高效節能,產(chǎn)生帶電液滴,從而產(chǎn)生離子深入交流研討。它的多功能性非常突出關註度,可以電離從小分子到大蛋白質(zhì)的各種化合物提供了遵循。 ESI 與液相層析法(LC)相容,可實現(xiàn)無縫分離和後續(xù) MS 分析,是代謝組學和脂質(zhì)組學的首選大部分。

串聯(lián)質(zhì)譜法(Tandem Mass Spectrometry, MS/MS)

MS/MS 分為兩個階段,首先分離離子高產,然後將選定的離子進行碎片化信息化技術,最後對碎片進行分析。其優(yōu)點在於提供詳細的結(jié)構(gòu)信息良好,尤其是勝肽的結(jié)構(gòu)資訊逐步顯現。透過瞄準特定離子並監(jiān)測其碎片自動化裝置,MS/MS 提供了無與倫比的特異性和精確性應用前景,使其在蛋白質(zhì)組學和精確定量分析方面具有無可估量的價值可能性更大。

質(zhì)譜樣品製備

為質(zhì)譜分析準備生物樣本的過程搖籃。這包括從複雜混合物中提取、純化和濃縮相關(guān)分子推動。其主要目的是確保樣本的形態(tài)適合質(zhì)譜分析,不含可能幹擾質(zhì)譜讀數(shù)的污染物姿勢,且濃度足以被檢測到綠色化。

如何實現(xiàn)質(zhì)譜樣品製備過程的自動化:

  • 移液工作站:這些工作站可以自動進行移液保持穩定,減少人為錯誤並提高通量。
  • 自動化SPE系統(tǒng): 無需人工幹預(yù)即可處理萃取和淨化步驟支撐能力。
  • 整合系統(tǒng): 有些系統(tǒng)可以整合樣品製備過程中從萃取到淨化到濃縮的多個步驟集成。

質(zhì)譜樣品制備從未如此簡單

OT-2是一款臺式液體處理器大大縮短,設(shè)計易于使用,足夠靈活培訓,可以自動化許多常見應(yīng)用不合理波動。

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質(zhì)譜儀樣品製備自動化比手動移液的優(yōu)勢:

  1. 一致性與可重複性: 自動化減少了人為錯誤帶來的可變性。
  2. 吞吐量更高: 自動化系統(tǒng)可同時處理多個樣品重要工具,提高效率積極拓展新的領域。
  3. 降低污染風險: 減少人工處理意味著減少引入污染物的機會。
  4. 節(jié)省時間: 自動化可讓研究人員專注於數(shù)據(jù)分析和解釋更優質,而不是重複性的樣品製備任務(wù)相對開放。

資源聚焦

Opentrons 可協(xié)助您透過 OT-2和Opentrons Flex的開源協(xié)議實現(xiàn)質(zhì)譜樣品製備自動化

質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)


氣相層析質(zhì)譜法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)

氣相層析質(zhì)譜儀專門分析揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性化合物。它融合了氣相層析法的分離能力和質(zhì)譜法的鑑定能力脫穎而出,通常用於法醫(yī)拓展應用、環(huán)境監(jiān)測和風味分析管理。它的優(yōu)點在於利用完善的庫對有機化合物進行精確鑑定。     

液相層析質(zhì)譜法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS)

液相層析質(zhì)譜法將質(zhì)譜法的適用範圍擴展到熱敏性和非揮發(fā)性化合物技術節能。透過將液相層析的廣泛分離能力與詳細的質(zhì)譜分析相結(jié)合基石之一,液相層析質(zhì)譜法在蛋白質(zhì)體學、藥物開發(fā)和代謝物分析中變得非常有價值增持能力。它能夠處理更大追求卓越、更多樣化的分子合理需求,彌補了 GC-MS 的不足是目前主流。

GC-ms LC-ms
概述 氣相層析與質(zhì)譜聯(lián)用 液相層析與質(zhì)譜聯(lián)用
樣品類型 揮發(fā)性和熱穩(wěn)定化合物 非揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定化合物
電離技術(shù) 電子轟擊電離(EI)、化學電離(CI) 電噴霧電離(ESI)高質量、大氣壓力化學電離(APCI)
應(yīng)用 法醫(yī)學充分發揮、環(huán)境監(jiān)測、藥物檢測管理、風味分析 蛋白質(zhì)體學設計、藥物開發(fā)、代謝物分析
複雜性與維護 中等改進措施;維護主要集中在柱子和質(zhì)譜的條件上 較高就此掀開;可能出現(xiàn)柱子堵塞和污染
解析度 高(取決於柱子和儀器) 高(取決於柱子和儀器)
典型用途 藥物檢測、環(huán)境污染物今年、代謝組學 生物分子穩步前行、勝肽、藥物動手能力、大型有機分子
檢測器靈敏度 對揮發(fā)性化合物靈敏度高 靈敏度高逐步改善,尤其是現(xiàn)代檢測器,適用於更廣泛的化合物
優(yōu)點 對各種揮發(fā)性有機化合物有效提升,方法成熟且有完整的資料庫 適用範圍廣自動化裝置,可以處理較大和更多樣的化合物
限制 僅限於揮發(fā)性和熱穩(wěn)定化合物,電離時可能產(chǎn)生碎片化使光譜複雜化 由於多步驟操作占,可能導致樣品流失或降解,靈敏度可能受基質(zhì)效應(yīng)影響

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