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C18色譜管柱全數(shù)十八烷基矽烷鍵結(jié)矽膠層析管柱解決問題,是一種反相層析管柱。其中「C18」指的是固定相的化學(xué)結(jié)構(gòu)引領,即色譜柱填料為十八烷基矽烷鍵結(jié)相,這種色譜柱的固定相是經(jīng)由化學(xué)鍵結(jié)的十八烷基官能基吸附在矽膠基質(zhì)上的擴大。 C18色譜柱的原理是基於化合物在C18填充物表面上的親疏水性差異達到,透過(guò)溶劑梯度洗脫來(lái)實(shí)現(xiàn)化合物的分離發展空間。具體來(lái)說(shuō)效果,非極性載體表面具有疏水特性,能夠吸附非極性化合物足了準備,而偏極性的流動(dòng)相中通常包含有機(jī)溶劑和緩衝液合作關系,其極性較高,在分離中發(fā)揮重要作用深刻內涵。
一傳遞、新管柱活化1、沖洗:新管柱使用前需以純有機(jī)試劑(如甲醇深入闡釋、乙腈)低流速?zèng)_洗相關性,沖洗體積以20倍柱體積為宜,以便固定相能充分潤(rùn)濕物聯與互聯、碳鏈能舒展最深厚的底氣,使色譜管的性能達(dá)到最佳狀態(tài)。 2.防脫殼處理:將新柱浸入純甲醇或乙腈溶液中堅實基礎,旋轉(zhuǎn)或以其它方式使其表面完全接觸至少30分鐘稍有不慎。洗去大部分殘留有機(jī)物之後,用純水或75%甲醇或乙腈沖洗2~3次直到輸出液為無(wú)色無(wú)味等地。 3.酸鹼洗處理:在防脫殼處理完成後,使用0.11%的醋酸溶液滴於色譜柱表面並停留約30分鐘尤為突出,並徹底用DI水沖洗乾淨(jìng)規定。再以0.11%的氨水溶液吸附含氨基的樣品於管柱上並停留約30分鐘,之後再以DI水推出至輸出穩(wěn)定空間載體。 4.梯度洗脫:加入摩爾比1:1的異丙醇和甲酸製成的混合液進(jìn)管柱中高質量,在流速為0.5 mL/min的條件下梯度洗脫(10% B,3min重要組成部分;40% B流程, 3min;95% B勃勃生機,3min助力各業,重置至10%過(guò)渡三分鐘)極致用戶體驗,使其開(kāi)放性自由膠體的更快恢復(fù)。
二應用、日常使用1建議、樣品處理:確保樣品經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理,去除雜質(zhì)及乾擾物質(zhì)相貫通,以提高分離效果不斷發展。 2.流動(dòng)相選擇:依實(shí)驗(yàn)要求選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相組成與比例。 3.流速控制:控制適當(dāng)?shù)牧魉僮詣踊桨?,避免過(guò)高或過(guò)低的流速影響分離效果緊密協作。 4.壓力監(jiān)測(cè):在使用過(guò)程中,注意監(jiān)測(cè)色譜柱的壓力變化線上線下,及時(shí)發(fā)現(xiàn)並處理異常狀況發揮重要作用。
三、維護(hù)1過程中、沖洗層析管:每日實(shí)驗(yàn)結(jié)束後去突破,應(yīng)沖洗層析管柱,尤其是流動(dòng)相中含有酸或鹽時(shí)全面革新,需將層析管中的酸或鹽沖洗乾淨(jìng)作用,通常建議以10%甲醇水沖洗20倍柱體積。 2.避免高水相條件:由於C18柱(極性改質(zhì)處理的除外)的固定相疏水性較強(qiáng)行業分類,在使用過(guò)程中盡量不要使用高水相條件技術特點,若水相比例過(guò)高,易引起固定相疏水塌陷發展邏輯,導(dǎo)致柱效快速下降凝聚力量,甚至造成不可逆的負(fù)面影響。建議使用過(guò)程中水相比例不超過(guò)90%聽得進。 3.再生處理:當(dāng)色譜管壓力升高新的力量、管柱性能下降時(shí),通常為色譜管柱被污染便利性,對(duì)色譜管進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分管柱效全面展示。
四、長(zhǎng)期保存1深刻認識、沖洗:長(zhǎng)期保存前要將層析管沖洗3~4小時(shí)以上核心技術。 2.保存溶劑:保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液(如90%甲醇水)中。若第二天需繼續(xù)使用主動性,日常保存溶劑也盡量與此相同創造性。
五、注意事項(xiàng)1、避免劇烈震動(dòng):以免損壞色譜管規模設備。 2.防止乾燥:長(zhǎng)期不使用時(shí)真諦所在,應(yīng)確保色譜管內(nèi)充滿適當(dāng)?shù)娜軇瑏K封好兩端堵頭十分落實,以防止乾燥和污染倍增效應。 3.使用壽命:C18色譜管柱的使用壽命約為100~200次,當(dāng)輸出結(jié)果的峰形變得模糊製造業、輸出穩(wěn)定性下降時(shí)優化服務策略,請(qǐng)及時(shí)更換新柱。
六發展基礎、常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案1兩個角度入手、鹽析問(wèn)題:使用C18色譜管柱時(shí),可能會(huì)出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象同期。這通常是由於流動(dòng)相中的鹽類物質(zhì)在色譜柱中析出所致生產效率。為了解決這個(gè)問(wèn)題,可以採(cǎi)取優(yōu)化流動(dòng)相組成產業、使用耐高鹽的比例閥或加裝柱溫箱等措施滿意度。
2.色譜管阻塞:色譜管阻塞是另一個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題。這可能是由於流動(dòng)相中的雜質(zhì)可持續、樣品中的不溶性物質(zhì)或緩衝鹽類物質(zhì)在色譜柱中沉積所致主要抓手。為了解決這個(gè)問(wèn)題,可以採(cǎi)取使用高水相進(jìn)行沖洗構建、使用保護(hù)柱或柱前過(guò)濾器等措施來(lái)防止堵塞的發(fā)生創新科技。如果色譜管已經(jīng)阻塞,可以嘗試使用反沖或超音波清洗等方法進(jìn)行恢復(fù)共創輝煌。但請(qǐng)注意具有重要意義,柱芯和某些類型
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