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分子分析需要精確的移液試劑和具有不同性質(zhì)的樣品——包括黏性的那些可以堵塞尖端新品技,分佈不均勻和複雜的再現(xiàn)性又進了一步。這款Opentrons OT-2是自動液體處理機器人,能夠去除這些困難的液體多種。屬性中的預(yù)設(shè)參數(shù)Opentron協(xié)議PythonAPI優(yōu)化了高效和準(zhǔn)確的處理水試劑。常用的試劑在黏度、蒸發(fā)速率和表面張力等性能方面都有所不同不斷完善。這些固有的液體特性需要改變的預(yù)設(shè)協(xié)定參數(shù),以滿足對給定工作流程的最佳處理方便。本應(yīng)用程式說明重點在於最佳基於使用基於電腦視覺的方法和重量方法進行的測試基礎上,使用中心OT-2自動處理黏性液體的實踐各領域。
黏性液體黏性液體具有不同的流變特性,如不同的密度(例如取得顯著成效,油性低,但甘油性高)實現,不同的表面張力(例如不容忽視。肥皂液含量較低,但汞含量較高)服務體系,黏性等說服力。我們將黏性液體分類,如蜂蜜分析、甘油和油表示,可能需要專門的移液參數(shù)。
表1:黏性液體的表徵依其分子結(jié)構(gòu)非常激烈、蒸氣壓和表面張力的不同競爭力所在。
糖化液體糖基化液體由糖組成,對移液管尖端壁具有較高的附著力領域,且相對較高與表1中提到的其他黏性液體類別相比的黏結(jié)力發展需要。這些液體的黏度隨稀釋程度的不同而不同。由於這些液體黏在尖端管理,減緩了抽吸後取出尖端的速度顯示,並從液體中分配,有助於避免氣泡效率和安、液滴的形成設計能力,以及清潔的抽吸和分配。
揮發(fā)性黏稠液體揮發(fā)性黏性液體是甘油/聚乙二醇和揮發(fā)性溶劑如乙醇或異丙醇原型的一種混合物深入開展。甘油/聚乙二醇的加入增加了黏度更為一致,而揮發(fā)性溶劑增加了蒸汽壓。因此技術的開發,當(dāng)移液管這樣液體時至關重要,使用者可以使用預(yù)設(shè)的吸入流量用於水。然而服務品質,分配流量需要是減少的為了抵消由於較高的蒸汽壓而造成的滴液問題的發生,在吸入後增加一個氣隙是必要的,以確保準(zhǔn)確的移液影響。
黏性界面活性劑液體黏性界面活性劑液體是表面活性劑和黏性糖基化液體的混合物新的動力。最受歡迎的黏性界面活性劑是吐溫?20和特里頓?X-100,黏度最高可達400毫帕卡秒(mPa)發展契機。這些液體表現(xiàn)出更高的黏附在吸管尖端廣泛關註,但黏附力較低促進進步。黏性界面活性劑必須以較慢的吸流量吸入,並以最小的抽出速度抽出優勢領先。需要降低分配流量迎來新的篇章,使液體有足夠的時間離開移液管尖端的壁面。
一種補償慢流量的一種方法是使用更長的延遲與兩步驟分配推動並實現。舉個例子薄弱點,如果你是用GEN2 P300單通道移液管分配200 uL黏性界面活性劑,將分配步驟分為兩部分:首先分配?至?優化程度,增加液體流向尖端孔的暫停積極性;然後,分配慢於?的50 uL不斷豐富,確保增加額外的吹出步驟和較慢的觸摸尖端步驟實施體系。作為快速分配的額外步驟,當(dāng)移液管接觸到井壁時擴大公共數據,可以實施觸摸分配策略深度。
油油表現(xiàn)出與黏性表面活性劑相似的性質(zhì),可以用上述方法來處理核心技術體系。油需要完全從牆上滑下來的時間更長與時俱進,這意味著移液管需要更長的時間。較慢的提取有助於減少油粘在吸管尖端外壁的損失初步建立,但由於油對尖端的粘附力高於油的粘結(jié)力綜合運用,清潔分配油需要更長的液體沉降時間,導(dǎo)致延遲的方法。根據(jù)油試劑的死體積損失估計實事求是,在吸入和分配步驟後可以實施更長的延遲。觸摸提示分配和觸摸提示功能也是透過增加更快的分配速度來減少損失的好方法落到實處。較慢的吸入和分配服務水平,較慢的尖端抽出液體,以及較慢的吹出流速是影響?zhàn)ば砸后w處理經(jīng)驗和清潔液體移液的關(guān)鍵參數(shù)技術創新。
方法基於液體的流變特性處理方法、移液管的規(guī)格和所使用的實驗室器皿的輪廓,我們開發(fā)了使用OT-2的黏性液體處理的最佳化策略持續向好。本研究僅限於視子GEN2單通道移液管的黏性液體處理能力習慣。所實現(xiàn)的液體處理功能是吸入和吸入和分配;當(dāng)複雜液體混合或形成進展情況,不同的工作流程可能需要不同的參數(shù)時的積極性,參數(shù)可能無法運作。
材料以不同稀釋的甘油99%(Sigma-Aldrich至關重要,G5516)稀釋分子級水的比例(Invitrogen不久前,卡諾稀釋不同稀釋的甘油用上了。10977023).1甘油是一種黏性液體,黏度從1mPa到1400mPa能力建設,隨稀釋度而不同關註。因此,我們認(rèn)為甘油是黏性類的代表性液體無障礙,可以定性地理解黏度連日來,並與類似黏度的液體進行比較。由於甘油的黏度呈指數(shù)級增長發揮重要帶動作用,我們選擇了10%意向、90%和99%的甘油進行參數(shù)開發(fā)深入實施。所有濃度都在15 ml獵鷹管中至關重要,10 ml甘油和水的兩種比例:甘油90%,甘油10%效果。 15號管機架轉(zhuǎn)接器放置在7號機架上有所應。測試使用Opentrons GEN2單通道V2.2移液管: P20、P300和P1000合作關系。我們也使用了P20提示和P300過濾器提示和P1000過濾器提示著力提升。採用整合式溫度計和濕度計。
重量測試方法重量測試是在一個客製化的鑽孔機上進行的傳遞,稱重秤附在OT-2上融合。比例尺被放置在一個單獨的工作臺上,以隔離由OT-2產(chǎn)生的振動相關性。甘油的濃度分別為10%完成的事情,90%和99%分子級水在重量測試臺上進行了測試。 . 3體積1uL穩定、10μL和20μL用P20 GEN2移液管測試改造層面,每體積4次。 P300 GEN2移液管20μL優勢與挑戰、150μL和300μL經驗分享,每體積10次。 P1000 GEN2移液管100μL趨勢,500μLand 1000μL. 每卷重複10次有力扭轉。測試的室溫環(huán)境溫度為23°C~32°C,相對濕度為35%~45%一站式服務。
OT-2的程式設(shè)定參數(shù)為闌尾表A1發展需要、Python協(xié)定PAPI2.9中的A1、A2和A3管理,以所需的流量執(zhí)行抽吸、分配和吹氣。檢測水採用吸入開放以來、分配和井噴等預(yù)設(shè)參數(shù)反應能力。
優(yōu)化結(jié)果及討論預(yù)期選擇的三種濃度分別為99%、90%和10%的甘油是基於作為黏性液體類的代表的甘油的動態(tài)黏度必然趨勢。甘油的動態(tài)黏度為1.3mPa,10%為168 mPa甘油為90%,甘油為99%的濃度為893mPa應用。
圖1顯示,針對黏性液體的最佳化參數(shù)顯示出與水處理有更大的相關(guān)性:
圖1的結(jié)果顯示了使用GEN2 P20、P300和P1000移液管和過濾器的黏性液體越來越重要。準(zhǔn)確吸入的關(guān)鍵是具有較慢的流速線上線下、足夠的沉澱時間和較慢的提取速率。高黏性液體需要較低的吸出時間醒悟,即使用吸出較高的流速數據顯示。然而,補償是也逐步提升,不準(zhǔn)確的體積可以吸入由於重力和附著力在尖端記得牢。
這些結(jié)果是透過緩慢的抽吸和允許足夠的沉降時間來抽吸液體來克服這些黏附力來實現(xiàn)的。因此重要的作用,柱塞的液體吸入運動與被吸入液體所花費的時間之間的延遲時間可以被沉澱時間所克服更多可能性。雖然液體與尖端有很高的親和力,但提取速度更快結(jié)果是關(guān)於尖端周圍的液滴和液體溢出的信息積極回應。優(yōu)化後的參數(shù)實現(xiàn)了較慢的針尖提取速度重要性,導(dǎo)致清潔針尖退出,吸氣體積的高重現(xiàn)性多種場景,如表2所示多元化服務體系。
表2:分配黏性液體的最小損失。優(yōu)化後的參數(shù)允許視子GEN2 P20單通道移液管的<損失為0.9%擴大公共數據,GEN2 P300和視子GEN2 P1000單通道移液管的<損失為0.2%分配後的通道移液管深度。
第2P20分配損失
透過在尖端的狹窄區(qū)域內(nèi)同步液體的流動來除去多餘的液體,從而完全分配尖端內(nèi)的液體核心技術體系。此外開拓創新,減緩尖端的提取速度也有所幫助避免水滴飛濺和卡住。如果液體未混合,黏度沒有變化促進善治,抽吸和分配後的參數(shù)保持不變擴大。如表2所示,整個優(yōu)化後的配藥過程顯著減少了移液損失道路,為反應(yīng)提供了預(yù)期的目標(biāo)體積規模設備,從而提高了準(zhǔn)確性。
結(jié)論黏性測試結(jié)果驗證了具有GEN2單通道移液管的OT-2可以處理液體黏度不同指導,精度與OT-2的水處理能力相當(dāng)競爭力,精度高。優(yōu)化的建議的參數(shù)和指南提高了OT-2的液體處理性能進一步完善,並幫助確保成功的協(xié)議運行圖2和圖3總結(jié)了粘液類的實現(xiàn)和較低的流量和臨界沉降時間允許粘性液體沉降集聚;因此,連續(xù)的步驟調整推進,如緩慢吹出幫助以減少粘性液體損失狀況,使試劑的有效使用和提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如果排氣量對於液體分配來說過低或過高建強保護,則可以在吸氣前實施氣隙粘性液體具有較慢的分配速率同期,而不是較慢的噴射生產效率,以達到所需的空氣量使命責任,將粘性液體推出尖端,但權(quán)衡是使用,可以吸出的液體比移液管的最大限度更少合規意識。這可能不是最適合用於GEN2 P20單通道移液管的情況。最後有效性,強烈建議在抽吸和分配步驟後進行較慢的萃取速度創新內容,以防止液滴黏在尖端和試劑溢出在實驗室器皿中。
綜上所述廣泛關註,OT-2善於監督、GEN2單通道移液管和過濾器尖端可以最佳地處理黏性液體,提高協(xié)議的準(zhǔn)確性就能壓製。
黏性液體處理參數(shù)處理黏性液體的關(guān)鍵參數(shù)是分配流量更合理。如果你正在開發(fā)一種全新的黏性液體的方案,第一步是緩慢抽吸並緩慢抽出更優美,這樣你就有了一個乾淨(jìng)的抽吸循環(huán)各方面。較慢的流量和速度導(dǎo)致黏性液體處理。此外成效與經驗,你可以以觀察液體半月板未間斷的速度開始分配適應性。保持一個穩(wěn)定的半月板會導(dǎo)致清潔的分配和井噴。圖A1說明了與較高流速相關(guān)的問題:即如果爆炸內(nèi)多餘的液體沒有被清除,就會產(chǎn)生死體積方法。較高的流速迫使液體從中心排出行動力,多餘的液體會黏在尖端的壁上。如果移液管的井噴能力低於尖端內(nèi)部多餘的體積切實把製度,就會導(dǎo)致死容量統籌。因此,保持一個較低的流速是必要的協同控製。
原文網(wǎng)址:使用中心OT-2的黏性液體處理自動化
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